原代细胞培养条件:
温度:通常在37℃下进行,以模拟体内温度。
pH值:培养液的pH值应保持在7.2~7.4之间,以维持细胞的正常生理状态。
气体环境:在含有5% CO2的培养箱中进行,以促进细胞生长。
培养基:使用含有适当营养成分的培养基,如Eagle's MEM、DMEM等。
无菌操作:整个培养过程需要在无菌条件下进行,以防止污染。
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断!
产品名称 | 组织来源 | 结肠 | |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 | 产品货号 | CS-X3451 |
细胞简介:
人结肠成纤维分离自结肠组织;结肠在右髂窝内续于盲肠,在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分,大部分固定于腹后壁,结肠的排列酷似英文字母“M”,将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为:黏膜(上皮层、固有层、黏膜肌层),黏膜下层(疏松结缔组织),肌层(内环形、外纵行两层平滑肌),外膜(纤维膜或浆膜)。结肠成纤维细胞主要分布于外膜(纤维膜或浆膜)结缔组织内。成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的结肠成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
方法简介:
实验室分离的人结肠成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
质量检测:
实验室分离的人结肠成纤维采用 - 胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。
培养信息:
培养基:含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传3-5代左右
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
原代细胞培养的具体操作步骤如下:
组织处理:将动物组织从机体中取出,剪碎后用等消化酶处理,使其分散成单个细胞。
细胞计数:使用血细胞计数器或其他方法对细胞进行计数,确保细胞密度适中。
接种培养:将细胞悬液接种到培养瓶中,加入适量的培养基,置于37℃、5% CO2的培养箱中培养。
换液和传代:定期更换培养液,当细胞达到一定密度时进行传代培养,以维持细胞的生长状态。
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VTCN1重组小鼠 B7-H4 / B7S1 / B7x 蛋白 (Fc 标签) Protein
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IL1R2重组人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 Protein
FABP2 Protein Human 重组人 FABP2 / I-FABP 蛋白 (His 标签)
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人结肠成纤维细胞白介素8受体α(IL8Rα)重组蛋白 Recombinant Interleukin 8 Receptor Alpha (IL8Ra)
FABP2 Protein Human 重组人 FABP2 / I-FABP 蛋白 (His 标签)
VTCN1重组小鼠 B7-H4 / B7S1 / B7x 蛋白 (Fc 标签) Protein
PDCD1LG2 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (His 标签)
IL1R2重组人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 Protein
原代细胞的4种培养方法:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。