原代细胞VS细胞系:
用酶或机械方法直接从人或动物组织中分离出来的细胞。严格来说,从机体分离出来到传代之前的细胞称为原代细胞,绝大部分的原代细胞在体外可以分裂10-15次(这与细胞的端粒长短有关),再加上取材,成本等因素,通常会把培养的第一代到第十代以内的细胞统称为原代细胞。
商品属性:
组织来源 | 椎间盘组织 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
产品货号 | CS-X3008 | 生长特性 | 贴壁 |
细胞简介:
人椎间盘髓核细胞分离椎间盘组织;椎间盘是位于脊柱两椎体之间,分为中央部的髓核,富于弹性的胶状物质;周围部的纤维环,由多层纤维软骨环按同心圆排列。上下有软骨板,是透明软骨复盖于椎体上,下面骺环中间的骨面。上下的软骨板与纤维环一起将髓核密封起来。纤维环由胶原纤维束的纤维软骨构成,位于髓核的四周。纤维环的纤维束相互斜行交叉重叠,使纤维环成为坚实的组织,能承受较大的弯曲和扭转负荷。髓核,是乳白色半透明胶状体,富于弹性,为椎间盘结构的一部分,位于两软骨板与纤维环之间。由纵横交错的纤维网状结构即软骨细胞和蛋白多糖黏液样基质构成的弹性胶冻物质。婴幼儿时期的髓核含水量为80%-90%,即使到了老年,其含水量也在70%上下。髓核在出生时体积大而松散,位于椎间盘的中央,至成年时位置移至椎间盘的中后部;在成年以前构成髓核的主要物质是大量蛋白多糖复合体、胶原纤维和纤维软骨,随着年龄的增长,髓核中的蛋白多糖解聚增多,水分逐渐减少,胶原增粗并逐渐被纤维软骨所替代。
方法简介:
公司实验室分离的人椎间盘髓核经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
质量检测:
公司实验室分离的人椎间盘髓核采用胶原酶-混合消化法并结合软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每3-4天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
原代细胞一般传至10代左右,大部分细胞衰老死亡,但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去,存活的细胞一般能够传到40-50代,叫细胞株。当50代以后又会出现“危机”,这时有部分细胞的遗传物质发生了改变且带有癌变的特点,从而可能无限制地传代下去,称为细胞系。
也有认为细胞系指原代细胞培养物经传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。由此便引申出了后来的有限细胞系、无限细胞系,因此,细胞系狭义的是指可连续传代的细胞,广义是指可传代的细胞。而细胞株是通过选择法或克隆形成法,从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的单一细胞称为细胞株。
细胞系具有容易培养、种类多、价格便宜、无限传代等优点,也非常容易在培养、冻存中发生错误鉴定及交叉污染的问题。
公司正在销售的产品:
小鼠同型半胱酸(Hcy)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human dermatan sulfate (DS) ELISA Kit 人皮肤素(DS)ELISA试剂盒
HumanCpGoligodeoxynucleotide,CpG-ODNELISAKit 人未甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Chickehyroxine,T4ELISA试剂盒鸡甲状腺素(T4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
载玻片细胞PP2A蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次
MouseFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit小鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠铁蛋白elisa试剂盒 小鼠铁蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠铁蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠铁蛋白试剂盒、小鼠铁蛋白elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠糖原0酸化酶同工酶elisa试剂盒 小鼠糖原0酸化酶同工酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠糖原0酸化酶同工酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠糖原0酸化酶同工酶试剂盒、小鼠糖原0酸化酶同工酶elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠糖化血红蛋白elisa试剂盒 小鼠糖化血红蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠糖化血红蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠糖化血红蛋白试剂盒、小鼠糖化血红蛋白elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体elisa试剂盒 小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体试剂盒、小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
大鼠组蛋白H3(H3)ELISA试剂盒 ,英文名: H3 ELISA Kit
Nude mice of cyclooxygenase 2 (COX-2) ELISA Kit 裸鼠环加氧酶2(COX-2)ELISA试剂盒
Mouseinsulinaoaibodies,IAAELISAKit 小鼠胰岛素自身抗体(IAA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISAKit人巨噬细胞炎性蛋白2规格:48T/96T
土壤氮含量克尔道(Kjeldahl)法定量检测试剂盒20次
ELISAKitACA-IgA大鼠抗心0脂抗体IgA规格:48T/96T
HAVCR1重组食蟹猴 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 (His 标签) Protein
MTR-1A (Melatonin receptor-1A 0.5mgMTR-1A (Melatonin receptor-1A) 褪黑素受体(抗原)
PDE4B重组人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 标签) Protein
CFL1 Protein Human 重组人 CFL1 / N-cofilin 蛋白 (His 标签)
ENTPD5 Protein Mouse 重组小鼠 ENTPD5 蛋白 (His 标签)
人椎间盘髓核细胞MTR-1A (Melatonin receptor-1A 0.5mgMTR-1A (Melatonin receptor-1A) 褪黑素受体(抗原)
CFL1 Protein Human 重组人 CFL1 / N-cofilin 蛋白 (His 标签)
HAVCR1重组食蟹猴 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 (His 标签) Protein
ENTPD5 Protein Mouse 重组小鼠 ENTPD5 蛋白 (His 标签)
PDE4B重组人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 标签) Protein
原代细胞培养的具体步骤:
1、准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青的混合液中30-60分钟。
5、消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6、分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500-1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7、计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2-7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8、培养:置于37℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞,纱布塞易生霉菌,每次换液时需要换新塞。