本产品是基于ELISA夹心法用于外泌体定性定量的检测试剂盒,利用高性能CD9捕获抗体和CD81检测抗体可以灵敏地检测共表达外泌体表面标记的CD9和CD81靶标。本产品可适用于人体体液、细胞培养液等多种样本,能够实现对原始样本中的外泌体进行快速精准定量。
产品组分及储存条件
名称 | 规格 | 储存条件 |
捕获抗体包被板 | 96 T | 2-8 ℃ |
Exosomes标准品 | 1 mL*5瓶 | -20 ℃ |
酶标记物 | 10 mL | 2-8 ℃ |
显色液A | 6 mL | 2-8 ℃ |
显色液B | 6 mL | 2-8 ℃ |
终止液 | 6 mL | 2-8 ℃ |
浓缩洗液(20X) | 30 mL/瓶 | 2-8 ℃ |
稀释液 | 5mL | 2-8 ℃ |
有效期:产品有效期为1年
检验流程
1、检测前准备工作
①所有试剂应在使用前室温平衡至少15min。
②取浓缩洗液(20X),用蒸馏水或去离子水将20X浓缩洗液稀释成1X工作液,混匀备用。
(试剂盒提供稀释液,可自行用高浓度标准品稀释使用)
2、操作步骤
①准备已平衡好的板条和试剂,试剂充分摇匀。
②微孔板中分别加入各浓度Exosomes标准品以及待测样本(100μL/孔)。
③用封板膜封住反应孔,于37℃恒温条件下,避光孵育60min。
④孵育结束后,加入工作液洗液清洗3次,每次200-250μL/孔,洗板结束后在吸水纸上拍干。
⑤每孔加入100μL酶标记物,用封板膜封住反应孔,于37℃恒温条件下,避光孵育60 min。
⑥孵育结束后,加入工作液洗液清洗3次,每次200-250μL/孔,洗板结束后在吸水纸上拍干。
⑦配置显色底物工作液:将显色液A和B等比例混合得显色底物工作液(请配置完2 min 内使用)。
⑧各反应孔加入100μL显色底物液工作液,37℃恒温条件下避光反应30分钟。
⑨各反应孔加入50μL终止液,混匀后即刻测量OD450值(3min 内),并绘制XY线性曲线。
3、校准程序
采用XY线性拟合,确保线性相关系数R2≥0.99,每次进行实验时,必须进行完整的校准品操作,以绘制标准曲线。
校准点 | S1 | S2 | S3 | S4 | S5 |
浓度:ng/ml | 0 | 7.816 | 15.625 | 31.25 | 45 |
OD450 | 0.0737 | 0.3074 | 0.5183 | 0.8618 | 1.2945 |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘制标准曲线计算样本中的Exosome的含量。
注意事项
1. 本试剂盒需避光保存。
2. 本品仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。