【试剂描述】
Cell-Tracker荧光探针是用来监测细胞运动、定位、增殖、迁移、趋化和侵袭的工具。
Cell-Tracker Blue CMAC荧光探针是氯甲基衍生物,能自由穿透细胞膜进入细胞,在胞内转化生成不具细胞膜渗透性的反应产物。在细胞群内,染料只会转移到子代细胞,不会转移到邻近细胞。
Cell-Tracker Blue CMAC荧光探针
【技术参数】
英文名:7-amino-4-chloromethylcoumarin
分子式:C10H8ClNO2
分子量:209.63
生产厂商:西安强化生物科技
纯度:≥95%
溶解性:溶于DMSO
外观:白色固体
Ex/Em:353 nm/466 nm
储存条件:-20℃避光干燥
化学结构式
【染色液制备】
储存液配制:
用无水DMSO溶解粉末至25 mM(如5 mg粉末加954 μL DMSO),分装避光保存于-20°C,避免反复冻融。
工作液稀释:
根据实验需求,用无血清培养基稀释至0.5–25 μM:
长期染色或快速分裂细胞:5–25 μM(维持3–6代)。
短期活力检测:0.5–5 μM(减少细胞形态干扰)。
【染色步骤】
细胞处理:
贴壁细胞:在含盖玻片的培养皿中孵育;悬浮细胞:直接离心处理。
染色条件:37°C孵育15–45分钟,避光操作。
信号稳定化:
移除染色液后,加入新鲜培养基继续孵育30分钟,促进未反应染料排出。
固定与透化:
固定:3.7%多聚甲醛(PBS溶液)室温处理15分钟。
透化:冰冷丙酮处理10分钟(需抗体标记时)。
检测与成像
显微镜观察:使用DAPI或蓝色通道滤光片,荧光信号可维持至少72小时。
定量分析:通过荧光酶标仪检测(激发354 nm,发射469 nm)
【相关试剂】
Propidium Iodide碘化丙啶(粉末)
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Cell-Tracker Three-color Trial Kit (Green/Red/Deep red)活细胞示踪三色组合试剂盒(绿色/红色/深红色)
注意:本试剂用于科研领域,其他用途概不适用!
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