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操作步骤

1.  标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔 10 孔，在*、第二孔中分别加标

准品 100µl，然后在*、第二孔中加标准品稀释液50µl，混匀；然后从*孔、第二

孔中各取 100µl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液 50µl，

混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取 50µl弃掉，再各取 50µl分别加到第五、第六孔

中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各

取 50µl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50µl，混

匀后从第七、第八孔中分别取 50µl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准

品稀释液 50µl，混匀后从第九第十孔中各取 50µl弃掉。（稀释后各孔加样量都为 50µl，

浓度分别为 150 pg/mL，100 pg/mL ，50 pg/mL，25pg/mL，12.5 pg/mL）。

2.  加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样

品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl（样

品zui终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混

匀。

3.  温育：用封板膜封板后置37℃温育 30 分钟。

4.  配液：将 30（48T的 20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的 20倍）倍稀释后备用。 

5.  洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此

重复 5次，拍干。

6.  加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。

7.  温育：操作同 3。

8.  洗涤：操作同 5。

9.  显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色

15 分钟.  

10.  终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.  测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止

液后 15 分钟以内进行。

注意事项：

新鲜标本尽早检测，对收集后当天就进行检测的标本，及时储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，请造模取材后，将标本及时分装后放在-20℃或-80℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差，蛋白极易降解，直接影响实验质量，所以避免反复冻融。

安全性：

1． 避免直接接触终止液和底物。如不小心接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3． 不要用嘴接触试剂盒里的任何成份。

4 Elisa试剂盒请远离儿童

自备物品：

1 、 37 ℃ 恒温箱2 、 标准规格酶标仪3 、 精密移液器及一次性吸头4 、 蒸馏水

5 、 一次性试管6 、 吸水纸

卡迈舒（上海）生物一直秉承以用户需求为核心，在专注上海本地市场开拓的同时，为全国各地区科研单位提供实验高质量产品，优质、用心的服务赢得了众多同仁的信赖和好评，逐渐树立起公司良好品牌。公司不仅仅提供专业的科研产品，同时还建立了完善的售后服务体系，为您实验进行中遇到的问题和困难提供指导帮助。我司坚信，通过我们不断的努力和追求，一定能够实现与各大科研单位互利共赢！

ELISA法是免疫诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，根据已经使用的结果，认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查，而且由于一天之内可以检查几百甚*千份标本,因此，也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体，而且也可用于测定体液中的循环抗原，所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大，

可概括四个方面：

1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。

2、研究抗酶抗体的合成。

3、显现微量的免疫沉淀反应。

4、定量检测体液中抗原或抗体成份。

Elisa试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒是用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎（HEV）病毒 IgM 抗体ELISA检测。指标齐全elisa试剂盒供给科研单位实验研究,高校发布文献,可提供免费代检测,一周出数据,公司具有国内外的技术水平,更好的售后服务和优质的解决方案,为您提供高品质高服务高创新的产品。

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