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技术文章

培养基的常识及其配制方法解说

阅读:307发布时间:2013-3-5

 简介

  培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在2~6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,现在均改制成粉末。

  培养基的配制

  1.配料

  配方换算→在容器中加入少量水〔蒸馏水,自然水〕→按照配方称取各种药品〔依次加入〕→加足所需水量《一药一勺,取药后立即盖上瓶盖》。

  2.溶解

  淀粉溶解:少量冷水调成糊状

  加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95~97℃ ,且需要边

  加热边搅拌以防止烧焦。

  3.调PH

  用1N的盐酸或的1N NaOH把培养基调节到所要求的值。

  4.过滤

  滤纸或棉花进行过滤。

  5.分装

  一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。

  (1)三角瓶

  若作静置培养,则100 ml培养基/250 ml的三角瓶,zui多不能超过150 ml培养基/250 ml的

  三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15~20 ml培养基/250

  ml的三角瓶,保证通气良好。

  (2)试管分装

  液体培养基一般装4~5 ml,约试管的1/4高度;

  固体斜面培养基一般装3~4 ml,约试管的1/5高度。

  6.包扎

  分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。

  7.灭菌

  按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养

  基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。

  8.摆斜面

  灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。


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