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上海哈灵生物科技有限公司
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ELISA实验的注意事项以及技术指南
2013-8-21 阅读(793)
ELISA实验的注意事项！
1.认真并且仔细的阅读相关说明书
2.确保elisakit试剂盒没有过期。
3.根据说明书把需要的试剂事先配置好。
4.样品制备必须标准化，根据2-3％的金额重复的井制备的样品的体积比（存储），尝试做一个备份等分。短期内无法实验者，注意低温保存。
准备所有必要的实验其他项目如试管，枪头，移液器，离心机等。
根据检测到的数量的试样，以确定所需的试剂量。
7.根据说明书将所用试剂与室温平衡，配置好需要使用的试剂。
ELISA常见技术指南
1.选择时选择一种单克隆抗体和多克隆抗体配对;如果选择两个单克隆抗体，必须承认不同的抗原决定簇，从同一家公司选择的抗体对。
2.ELISA法检测时为了确定*的信号和zui低的背景应与对方捕获抗体（0.5-4μg/ml）和检测抗体（0.25-2μg/ml）在预实验命题滴定。在同一时间应包括在适当范围内的标准品稀释系列。提供的试剂由传统的手工操作的范围。
3.标准品的配制：对于每一个细胞因子应仔细阅读说明书注意每个批次的细节。在使用细胞因子前应该瞬时离心试剂瓶，尽可能多收回其中的细胞因子。
4.正常情况等测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做八次二倍系列稀释从2000pg/毫升到15pg/毫升。可借助标准的ELISA使用流程、第三类试剂、放大试剂盒、或改变酶底物系统可在一定范围内促使提高灵敏度。
5.因为要优化灵敏度，建议标准和样品孵育过夜。
6.如果您正在使用过氧化物酶作为一种颜色系统，应禁止在洗涤和稀释剂加入*，*抑制过氧化物酶的活性。
