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上海哈灵生物科技有限公司
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公司信息
基质金属蛋白酶(MMP)明胶酶谱法电泳分析试剂盒产品说明书
2016-6-20 阅读(578)
主要用途
我公司基质金属蛋白酶(MMP)明胶酶谱法(gelatin-zymography)电泳分析试剂是一种旨在通过明胶聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,在分离、蛋白复性、底物水解、染色等一系列步骤下,观察并半定量深蓝色背景中的无色清晰的基质金属蛋白酶条带,根据分子量确定特异基质金属蛋白酶及其活性的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞萃取样品(动物、人体、植物、昆虫等)、培养上清悬液、血清和关节滑液或脑脊液等基质金属蛋白酶-2,9,以及13等活性及其抑制剂的检测。产品即到即用,性能稳定,操作便捷,敏感度高,条带清晰,重复性好。
注意事项
- 本产品为5次(45个样品)操作
- 操作时,须戴手套
- 样品准备要点如下:
- 必须澄清,至关重要:4℃高速离心5分钟,速度为10000g,置于-70℃保存待测
- 样品中避免使用EDTA、EGTA等二价阳离子鳌和剂以及巯基乙醇和DTT等
- 样品中避免使用硫醇抑制剂(THIOL INHIBITOR)
- 由于TIMP等天然抑制剂的存在,血清样品中的基质金属蛋白酶活性很低,可以使用活化剂(建议使用胶原酶潜酶活化剂(APMA)-12197)
- 如果验证样品中基质金属蛋白酶,可以使用抑制剂EDTA对照
- 避免培养细胞上清样品显示黄色,表明已经过于酸性,须调整pH为中性方可使用
- 胶体和胶顶配制前,须25℃预热相关试剂
- 电泳前注意清洗样品孔
- 电泳运行,注意安全
- 染色时,避免光照