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上海哈灵生物科技有限公司
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公司信息
酵母氢ATP酶活性酶连续反应光谱法定量检测试剂盒 产品说明书
2016-7-13 阅读(553)
主要用途
我公司酵母氢ATP酶（H＋-ATPase）活性酶连续反应光谱法定量检测试剂是一种旨在使用氢ATP酶、丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶连续循环法反应系统，在排除其它ATP酶干扰的情况下，受到氢ATP酶的水解产生的ADP过程中，伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）的氧化反应， 即采用光谱法测定其氧化后吸光峰值（NADH浓度）的变化，以此进行测算单位酶活性的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种酵母细胞H＋-ATP酶的特异性活性检测。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。
注意事项
1． 本产品为21次操作，包括背景对照测定
2． 操作时，须戴手套
3． 系统操作过程中，背景测定只需1次
4． 建议样品忌用磷酸缓冲溶液、钠盐、钾盐、镁盐、EDTA、EGTA等，可以使用SUCROSE、IMIDAZOLE等
5． 用户如果检测质膜型氢ATP酶活性，建议使用真菌/酵母细胞膜蛋白（本公司提供可溶性真菌/酵母细胞膜蛋白粗提制备试剂盒30043.1）
6． 用户如果检测液泡型氢ATP酶活性，建议使用真菌/酵母细胞液泡蛋白（本公司提供真菌/酵母膜性囊泡（RSOV和IOV）制备试剂盒10169.3）
7． 强化液（Reagent B）为固体状，移取方法为：使用1毫升枪头，将部分剪去；或使用0.5毫升PCR管的盖子内圈盛满；或秤重0.1克
8． 加入样品启动反应后3秒内即刻光谱测定
9． 反应测定值由高到低变化；测定可以持续30分钟
10． 测定值由高到低变化，即0分钟测定读数高于10分钟或30分钟测定读数，表明有酶活性
11． 光谱测定后，比色皿须清洗*
12． 建议待测样本蛋白浓度为50微克/50微升；如果样本酶活性过低或过高，则可以增加或降低样本量；注意计算公式的调整（本公司提供 Bradford蛋白质浓度定量试剂盒30030.1）
13． 样品特异活性是指排除其它，包括钙（EGTA处理）、钠钾（乌本苷；ouabain处理）等ATP酶的干扰后的氢ATP酶活性
14． 氢ATP酶活性单位浓度定义：在28℃温度下，pH 7.5条件下，每分钟内能够氧化1微摩尔还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）所需的酶量作为一个活性单位
15． 本公司提供系列ATP酶类分析技术产品
如：
细菌氢ATP酶（H＋－ATPase）活性比色法定量检测试剂盒
植物氢ATP酶（H＋－ATPase）总活性比色法定量检测试剂盒
植物P型氢ATP酶（H＋－ATPase）活性比色法定量检测试剂盒
植物V型氢ATP酶（H＋－ATPase）活性比色法定量检测试剂盒
植物F型氢ATP酶（H＋－ATPase）活性比色法定量检测试剂盒
