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真菌/酵母细胞β1,3- D-葡聚糖合成酶活性定量检测说明书

2015-4-17  阅读(1909)

提 供 商 上海哈灵生物科技有限公司 资料大小 266.7KB
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【详细说明】

主要用途
真菌/酵母细胞β1,3- D-葡聚糖合成酶活性定量检测试剂是一种旨在通过β1,3- D-葡聚糖合成酶反应系统中尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖底物聚合成葡聚糖,与荧光染料结合产生荧光峰值的变化,来测定样品中酶活性的而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种真菌或酵母细胞株裂解悬液中β1,3- D-葡聚糖合成酶的活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,具有高通量特点。
技术背景
真菌/酵母细胞壁结构具有丰富的糖蛋白外层和碳水化合物内层,包括(1,3)-β-D,(1,6)-β-D和(1,3)-α-D-葡聚糖(glucan)。其中(1,3)-β-D为主要元素。1,3-β-D-葡聚糖合成酶(1,3-β-D-glucan synthase;GS;EC.2.4.1.34),又称为尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖:1,3-β-葡萄糖基转移酶(UDP-glucose:1,3-β-glucosyl transferase),催化以尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖(UDP-glucose)为底物,通过1,3-β链接聚合为葡聚糖的反应,构成真菌/酵母细胞壁结构中主要碳水化合物成分1,3-β-D-葡聚糖,为细胞生长所必需。1,3-β-D-葡聚糖合成酶具有两种结构体:1个调节亚体,GTPase Rho1p和4个催化亚体,Bgs1p-4p或Fksp。(1,3)-β-D-葡聚糖合成酶成为抗真菌药物,例如卡泊芬净(caspofungi)等的靶标。基于底物UDP-glucose在葡聚糖合成酶的催化下,聚合成(1,3)-β-D-葡聚糖产物,与苯胺蓝(Aniline blue;4,4-(carbonyl-bis(benzene-4,1- diyl)-bis-(imino)-bis-benzenesulfonic acid)反应产生复合物,呈现荧光峰值的变化(激发波长400nm,散发波长460nm),由此定量测定β1,3- D-葡聚糖合成酶的活性。



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