IgG饱和硫酸铵盐析法

IgG（免疫球蛋白g）的分子量为150～160kDa，含量为血清的1．5％～1．8％，约占血清蛋白总量的17％，血清中免疫球蛋白总量的75％～
80％．19G是人类血清中zui重要的抗体，在体液免疫中起着“主力免疫”的作用[1IgG的纯化方法根据IgG的不同特性，IgG的纯化方法主要有以下方法：
饱和硫酸铵盐析法
盐析法是粗分离蛋白质的重要方法之一．因为蛋白质分子吸附某种盐离子后，其带电表层使蛋白质分子彼此排斥，而蛋白质分子与水分子间的相互用却加强，因而溶解度提高．但当大量中性盐加入，使水的活度降低，进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和，水化膜逐渐被破坏，zui终引起蛋白质分子间相互聚集并从溶液中析出．硫酸铵是盐析zui常用的无机盐，其主要特点是溶解度大，随温度变化小；对蛋白质有保护作用，高浓度时可抑制微生物和蛋白酶的活性；溶解于水时不产生热量，价格低廉，但在碱性环境中不能用硫酸铵作为沉淀剂进行盐析反应．在血清中加入硫酸铵，当饱和度为28％～33％时，优球蛋白析出；33％～55％时，拟球蛋白析出；饱和度大于50％
后，白蛋白析出，这是硫酸铵分析沉淀血清蛋白的一般规律[目前用硫酸铵制备IgG的一般步骤如下：取血清lO mL，与等量的生理盐水混合，逐滴加入中
性饱和硫酸铵，使其饱和度为50％，室温放置1 h后，离心取沉淀．沉淀用20 mL生理盐水溶解后，逐滴加人中性饱和硫酸铵，使其饱和度为33％，室温放置1 h后，离心取沉淀，沉淀用5 mL生理盐水溶解，即为IgG粗制品，然后将上述IgG粗制品，于0．01 mol／L pH7．4的磷酸盐缓冲液的大烧杯中透析约24 h，换液3～4次，至透析液中无硫酸根离子为止．要获得较高纯度IgG，一般还需再用DEAE一纤维素柱层析纯化．该法技术含量高有经济意义，
且制得的IgG也有一定的经济价值C6]．

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