小鼠转化生长因子β1（TGF-β1）酶联免疫分析免费代测

时间：2013/5/24阅读：229

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免费代测ELISA试剂盒一周内出结果

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北京雅安达生物技术有限公司立足于北京，面向全国。本产品应用于“科研研究和临床应验”

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主营产品： ELISA试剂盒，生物试剂，免疫组学，生物抗体，蛋白组学，分子生物等。

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围： 96T

3pg/ml-120pg/ml

使用目的：

本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中转化生长因子β 1（TGF-β1）含量。实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠转化生长因子β 1（TGF-β1）水平。用纯化的小鼠转化生长因子β1（TGF-β1）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入转化生长因子β 1（TGF-β1），再与HRP标记的转化生长因子β 1（TGF-β1）抗体结合，形成抗体 -抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物 TMB显色。TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的转化生长因子β1（TGF-β1）呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度（ OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠转化生长因子β 1（TGF-β1）浓度。

试剂盒组成

1	30倍浓缩洗涤液		20ml×1瓶		7	终止液	6ml×1瓶
2	酶标试剂		6ml×1瓶		8	标准品（240pg/ml）	0.5ml×1瓶
3	酶标包被板		12孔×8条		9	标准品稀释液	1.5ml×1瓶
4	样品稀释液		6ml×1瓶		10	说明书	1份
5	显色剂 A液		6ml×1瓶		11	封板膜	2张
6	显色剂 B液		6ml×1/瓶		12	密封袋	1个
120pg/ml		5号标准品		150μl的原倍标准品加入 150μl标准品稀释液
60pg/ml		4号标准品		150μl的 5号标准品加入 150μl标准品稀释液
30pg/ml		3号标准品		150μl的 4号标准品加入 150μl标准品稀释液
15pg/ml		2号标准品		150μl的 3号标准品加入 150μl标准品稀释液
7.5pg/ml		1号标准品		150μl的 2号标准品加入 150μl标准品稀释液

标本要求

1 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于 -20℃保存，但应避免反复冻融

2 NaN3的样品，因 NaN3抑制辣根过氧化物酶的（ HRP）活性。

操作步骤

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl，待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl（样品zui终稀释度为 5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 3 0分钟。

4.配液：将 30倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30倍稀释后备用

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30秒后弃去，如此重复 5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同 3。

8.洗涤：操作同 5。

9.显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀， 37℃避光显色15分钟.

10.终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.测定：以空白空调零， 450nm波长依序测量各孔的吸光度（ OD值）。测定应在加终止液后 15

分钟以内进行。

操作程序总结：

计算

以标准物的浓度为横坐标， OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的了解更多详细信息

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