试验原理:
S-100B试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知S-100B浓度的标准品、未知浓度的样品 加入微孔酶标板内进行检测。先将S-100B和*标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中S-100B的浓度呈比例关系。
人S100B蛋白试剂盒内容及其配制:
试剂盒成份 | 96孔配置 | 48孔配置 |
96/48人份酶标板 | 1块板(96T) | 半块板(48T) |
塑料膜板盖 | 1块 | 半块 |
标准品:200ng/ml | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) |
空白对照 | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) |
标准品稀释缓冲液 | 1瓶(8.0ml) | 1瓶(4.0ml) |
*标记的抗S-100B抗体 | 1瓶(8.0ml) | 1瓶(4.0ml) |
亲和链酶素-HRP | 1瓶(12ml) | 1瓶(5ml) |
洗涤缓冲液 | 1瓶(20ml) | 1瓶(10ml) |
底物A | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) |
底物B | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) |
终止液 | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) |
自备材料:
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
1、 血清……操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原
2、 血浆……EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液……1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆……将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
5、 保存……如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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