鲤鱼卵黄蛋白原ELISA试剂盒 实验原理
| 产品名称：鲤鱼卵黄蛋白原ELISA试剂盒 检测范围： 样品形式：血清/血浆/细胞培养上清/其它生物液体（具体情况请咨询） 保存与运输：短期4℃/长期-20℃保存 应用范围：科研检测试剂 北京雅安达生物经营产品包括Elisa检测试剂盒 -囊括小鼠、大鼠、人、犬、鸡、猴子、牛 兔 猪 鸭 植物等种属。全国：010 -57269780 标本的采集及保存 1. 组织匀浆: 将动物的组织标本先用PBS洗涤,去除多余血液,匀浆化后放在20mlPBS中于-20° C放置过夜,第二天,经过二次反复冻融破膜,将匀浆物5000x g离心5分钟,取上清即可检测。 2. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 注：以上标本置4℃保存应小于1周，-20℃或-80℃均应密封保存，-20℃不应超过1个月，-80℃不应超过2个月；标本溶血会影响zui后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测；高血脂的标本不需进行特殊处理，可直接检测。 Elisa试剂盒质量保证是一个复杂的过程，许多重要的环节都影响到检测的质量 一、方法学的影响 ELISA测定模式包括以下几种：双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM抗体捕捉法、竞争抑制法，其中竞争抑制法（HBeAb,HBcAb等采用）因受操作时差所引起的不公平竞争等因素的影响，结果重复性较差，质量较难控制。 二、试剂因素 不同批次的ELISA试剂在制作过程中很难保证质量*一致，即使是通过批批检的项目其检测结果也存在差异，因此必须选择和订购长批号的试剂，并保证保存条件。严格执行这一标准可以避免因试剂批号改变而重新建立质控体系及重新评估试剂的复杂过程，并且能够保证结果的稳定性；对于效期短、使用率低的试剂，应当小量分装，每次使用则取分装部分即可，避免反复冻融造成试剂的失效。 三、样本因素 标本干扰因素包括内源性干扰因素和外源性干扰因素，前者包括类风湿因子、补体、异嗜性抗体、自身抗体、*等，后者包括标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时间过长、标本凝固不全、冷冻标本的反复冻融等。 四、操作因素对ELISA结果的影响 ELISA操作步骤复杂，操作不当将引起较大的误差。以下叙述各个步骤中的影响因素。 1.加样 2.温育 3.洗涤 4.显色 5.比色 五、灰区的设置 通常情况下，ELISA定性实验以“阳性”和“阴性”来报告结果，两者间有一条分界线被称为“阳性判断值”（cut-off value，CO值），这是定性免疫测定结果报告的依据。 六、标本复查 ELISA手工检测过程复杂，影响因素较多，即使室内质控在控，也可能因孔间差异而造成结果的差异，因此加大复查力度是保证结果准确性的可靠方法，比如对HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等项目的可疑、弱阳性标本及少见模式的检测结果进行复查。 七、结果判断和报告 常用下列几种方法表示结果： 1.定性测定 2.半定量测定 结果一般以滴度表示。 3.定量测定 即用已知量的标准品作一系列稀释后进行ELISA测定，绘制标准曲线，结果以量或单位表示。在ELISA定量检测中每一块反应板都必须绘制相应的标准曲线。。 |
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