产品说明:本产品是94 kDa的耐热性DNA聚合酶及配合其使用的10×PCR Buffer以及6×Loading Buffer。是将改良后的 DNA Polymerase的基因经过克隆转化到大肠杆菌中进行表达后,分离纯化而得到的性状优良,功能强大的DNA聚合酶。它比天然Taq DNA聚合酶有更加强大的功能以及更加高质量的活性。使用本产品扩增得到的PCR产物的3′端会进 行加“理,因此,PCR产物可直接用于T载体的酶连中。
活性定义:一个单位(U)的DNA聚合酶的活性定义为在74℃,30分钟内,以活性化的大马哈鱼DNA作为模板/引物,摄入10nmol的全核苷酸所需的酶量。
质量控制: SDS-PAGE检测纯度大于99%;经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残留DNA;能有效扩增人类基因组中的单拷贝基因;室温放置一周,活性无明显改变。
适用范围:增、DNA标记、DNA序列测定。
建议的PCR反应体系:(以50μl反应体系为例)
PD6201-100T Taq DNA polymerase|北京现货 (扩增速度快,性能稳定,较好的保真性,用量可酌情增减,较实惠。)
模板DNA(2.5ng-100ng) | 1μl |
Forward Primer (10 μM) | 2μl |
Reverse Primer (10 μM) | 2μl |
dNTP (10 mM ) | 1μl |
Taq DNA polymerase | 4μl |
10×PCR Buffer | 5μl |
ddH2O | 补足到50μl |
50 μl PCR反应体系中模板DNA*使用量
大肠杆菌基因组DNA | 10 ng~100 ng |
λDNA | 0.5 ng~5 ng |
质粒DNA | 0.1 ng~10 ng |
建议的PCR反应条件
步骤 | 温度 | 时间 | |
预变性 | 95℃ | 3 min | |
变性 | 95℃ | 30 sec | 25-35 cycles |
退火 | 50-70℃ | 30 sec | |
延伸 | 72℃ | 0.5-5min(0.5min/kb) | |
终延伸 | 72℃ | 5min | |
保温 | 4/16℃ | --- |
PD6201-100T Taq DNA polymerase|北京现货 注意事项:
1、 本产品提供的酶量可进行多次反应,配置过程应将酶尽量放在-20℃冰盒中。
2、PCR的反应液请在冰上配制,然后置于PCR扩增仪上进行PCR反应。这种冷启动法(Cool Start Method)可增强PCR扩增的特异性,减少PCR过程中的非特异性反应,能得到良好的PCR结果。
3、 PCR反应后,加入本产品提供的6×Loading Buffer按5:1混合均匀后加入凝胶孔进行电泳。