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北京RNeasy Plus Micro Kit (50)价格,qiagen74034现货

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更新时间:2017-01-03 14:12:34浏览次数:1328次

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北京RNeasy Plus Micro Kit (50)价格,qiagen74034现货
从细胞/组织样本中纯化至多45 µg总RNA,配有gDNA去除柱

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性能
RNeasy Plus Micro操作流程整合了RNeasy技术,可选择性去除双链DNA。去除基因组DNA后,使用RNeasy MinElute离心柱纯化得到高品质RNA。由此确保可重复获得高产量RNA,并高效去除基因组DNA污染,用于敏感的下游应用(参见High, reproducible RNA yields)。通常从组织和培养细胞中可获得Agilent RIN值接近10的总RNA。

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原理
细胞和易裂解组织首先在含有异硫氰酸胍的高变性Buffer RLT Plus中裂解和匀质化,能使RNases立即失活,以保证分离到完整的RNA。裂解液再流过gDNA Eliminator柱。该离心柱与高盐缓冲液共同作用,可选择性高效的去除基因组DNA。加入乙醇以提供RNA结合的合适条件,样本再加入到RNeasy MinElute离心柱。含有硅胶膜的特制离心柱能特异性的结合裂解细胞中的RNA。
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操作流程
RNeasy Plus Micro Kit能从多达5 x 105个细胞或5 mg组织中纯化总RNA,非常适于小样本抽提。简洁的工作流程可在30分钟内纯化得到已去除基因组DNA的RNA(参见RNeasy Plus procedure )。样本首先被裂解和匀质化。裂解液流过gDNA Eliminator柱,在流过gDNA Eliminator柱的溶液中加入乙醇,样本再上样到RNeasy MinElute离心柱。RNA结合到膜上,污染物被洗去。获得高品质RNA,洗脱体积14 µl。

处理不同的起始样本可用不同的实验方案。实验方案的不同之处主要在于样本的裂解和匀质化。样本上样到gDNA Eliminator柱之后的步骤就类似。此操作流程适合富集mRNA,不包括大部分小于200 nt的RNAs(如rRNAs和tRNAs)。RNeasy Plus操作流程稍作修改后可从培养细胞中纯化含miRNA等小RNAs的总RNA。

使用Buffer RLT Plus(RNeasy Plus Micro Kit提供)进行组织破碎和匀质化时,可能会产生过多泡沫。在破碎和匀浆前向Buffer RLT Plus中加入Reagent DX(单独提供)可充分减少泡沫产生。Reagent DX经仔细检测,表明配合此试剂盒使用不会影响RNA的纯度或下游应用。

全国: 刘 在线客服 

应用
RNeasy Plus Micro Kit纯化得到的RNA适合对少量DNA污染敏感的下游应用,如定量real-time RT-PCR。纯化得到的RNA还可用于其他应用。
RNeasy Plus Micro Kit适用于小样本,包括:
激光显微切割冰冻切片 细针穿刺

RNeasy Mini Kit (50) 74104 qiagen试剂

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