elisa实验原理

用人工合成或基因工程表达的HEV特异性多肽抗原包被微孔板，加入待检血清与其反应，再加酶标抗人IgG和底物显色。

主要试剂与器材

1.elisa试剂盒:内含包被用HEV特异性多肽、酶标抗人IgG、阳性和阴性对照血清、底物、洗涤液、稀释液等。

2.待检血清。

3.酶标仪等。

操作步骤

1.用HEV特异性多肽抗原包被微孔板，室温12h，洗3次。

2.每孔加稀释液100μl，待检血清5μl，37℃30min。设阳性、阴性对照。洗6次。

3.每孔加HRP-抗人IgG100μl，37℃30min，洗6次。

4.每孔加底物（TMB-H2O2）液100μl，室温显色15min。

5.加入10g/L SDS 50μl终止反应。

6.用酶标仪450nm波长测各孔OD值。

结果分析

1.阴性对照平均OD值＜0.10，阳性对照≥1.0为elisa试剂盒有效和操作无误。

2.P/N=(待检血清OD值/阴性对照平均OD值）≥2.1为阳性，反之为阴性。