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一管式病毒DNAout
产品及特点 本产品是专门用于从血清(血浆)等液体样品中提取病毒(如HBV)DNA的产品,其原理是异硫氰酸胍/LiCl溶液即能裂解病毒,又能沉淀DNA。本产品灵敏度高,稳定性好,使用简单快捷,尤其适合于整合到临床PCR检测试剂盒中。
1. 回收率高,可以达到90%以上,高于绝大部分基于离心柱的提取方法。
2. 灵敏度高,通过PCR检测到的zui终灵敏度可以达到30-50拷贝/mL。
3. 一管式操作,不使用离心柱,整个操作过程均在室温下完成。
4. 安全无毒,不需要使用*和氯仿等有机溶液。
5. 处理量大,如果加上病毒离心富集步骤,zui多可以处理1.5 mL液体病毒样品。
6. 与PCR和荧光PCR兼容。
规格及成分 成 份 50 次包装 200 次包装
病毒DNAOUT 30 mL 120 mL
使用手册 1份 1份
运输及保存 常温运输及保存,有效期一年。
自备试剂 异丙醇,70%乙醇
使用方法 1. 在1.5 mL螺旋盖塑料离心管(不要使用压盖式塑料离心管)中加入0.1-0.2 mL液体样品。如果病毒需要富集,可以将1.5 mL液体在4℃ 24,000 g冷冻离心60分钟, 移弃1.3 mL后继续操作。
2. 加入0.6 mL病毒DNAOUT溶液,振荡30秒混匀后室温放置10分钟。
3. 振荡30秒混匀后加入0.7 mL异丙醇,振荡30秒混匀后,15,000 g室温离心15分钟。
4. 移弃上清,注意不要触及管底的DNA沉淀,加入1.0 mL 70% 乙醇,振荡数秒后 15,000 g室温离心5分钟。
5. 移弃上清,注意不要触及管底的DNA沉淀。再短暂离心数秒, 移弃残留上清(残留的乙醇会影响后续反应)。此时离心面的管壁上将有可见的膜状沉淀,加入200 μl 超纯水,用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁的膜状沉淀,使其溶解。溶解液混浊或有少量不溶物是正常现象,如果溶于200 uL水而样品使用量不超过PCR体系的1/2时,不溶物一般不会影响后续PCR反应。不要离心只取上清使用,因为不溶沉淀物中含有DNA,必须取混合液使用(哪怕很浑浊)。
6. 样品可以直接取适量用于PCR,也可保存于-20℃长期保存。
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