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Hep G2肝癌细胞

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更新时间:2016-07-16 06:59:54浏览次数:542次

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Hep G2肝癌细胞ATCC株?询价

Hep G2肝癌细胞上海谷研科技有限公司的原代细胞株及血清,ATCC细胞株、hyclone澳洲特级胎牛血清,优等胎牛血清,标准胎牛血清,gibco特优级胎牛血清血清,新生牛血清。
细胞术检测样品制备方法
直接标记抗体(FITC标记抗体)Hep G2肝癌细胞
(1) 收集1×106个细胞,800rpm离心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室温固定40分钟,800rpm离心5min去上清。加2ml PBS重悬洗涤细胞,800rpm离心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重悬细胞,冰上孵育10min,800rpm离心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和饱和剂量的荧光标记抗体(5×105个细胞/20ul抗体)的PBS ,避光冰上放置30min,离心弃上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待测即可。
(4) 用流式细胞仪检测荧光值,每管计数10 000个细胞。[2]
未标记抗体间接免疫荧光标记法:
(1)收集2×106个细胞,用冷的PBS 2ml 洗涤细胞一次,800rpm离心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室温固定细胞40min,800rpm离心5min;2ml PBS重悬细胞,800rpm离心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重悬细胞,冰上放置10min,800rpm离心5min。
(4)加入饱和剂量未标记抗体,冰上放置40min,800rpm离心5min,用2ml冷的PBS 重悬细胞,800rpm离心5min,洗去未结合一抗,重复一次。
(5)加入荧光标记(FITC)标记的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm离心5min,去上清,PBS洗涤两次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重悬细胞;固定待测。
(7)流式细胞仪检测荧光值,每管计数10 000个细胞。
细胞周期、细胞凋亡及DNA倍体分析样品(PI染色)的制备:
(1)待测样本制成单细胞悬液,然后200g离心5分钟,弃上清。
(2)用4℃预冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小时。
(3)调整细胞浓度为106细胞/毫升,取1毫升细胞悬液,用PBS洗三次,细胞重悬于1毫升PI染液中,37℃孵育30分钟即可进行流式分析。
(4)PI染液终浓度为50微克/毫升,RNase A终浓度为20微克/毫升。

其他*产品:
Orthosilicic acid silica powder  62647-18-1
Orvepitat  579475-18-6
OSMANTHUS ABSOLUTE 木樨花浸膏 68917-05-5
OSUTIDINE  140695-21-2
OSW-1 OSW-1 145075-81-6
OTAVA-BB 7070707021 2-羟基-4-[[[[(4-甲苯基)磺酰基]氧]氨基]苯甲酸乙酰] 501919-59-1
O-TERPHENYL (D14)  5142-67-6
OTILONIUM BROMIDE * 26095-59-0
Ox Bile Powder 牛胆粉 75302-04-4
Oxalic acid 草酸 144-62-7
Oxaliplatin * 61825-94-3
OXALYL BROMIDE 草酰溴 15219-34-8
Oxandrolone 氧甲氢龙 53-39-4
Oxendolone 奥生多龙 33765-68-3
oxetan-3-aMine dihydrochloride 3-氧杂环丁胺 21635-88-1
Oxidase, D-aMino acid D-氨基酸氧化酶 9000-88-8
Oxirane,2-(chloroMethyl-d2)-,(2R)  1032237-24-3
Oxirane-2,2-d2,3-(chloroMethyl)  42329-11-3
Oxiraneacetic acid, 3,3-diMethyl-, Methyl ester (9CI)  1248-18-7
Oxirane-d,2-(chloroMethyl-d2)  159301-46-9
Oxireno[9,10]cyclodeca[1,2-b]furan-9(1aH)-one,7-(acetyloxy)-2,3,6,7,7a,8,10a,10b-octahydro- 1a,5-diMethyl-8-Methylene-,[1aR-(1aR*,4E,- 7R*,7aR*,10aS*,10bS*)]- LIPIFEROLIDE 41059-80-7
Oxybuprocaine 丁氧卡因 99-43-4
OXY-CHLORDANE 氧化氯丹 27304-13-8
细胞冻存
1.将细胞消化下来,移入离心管离心,弃上清
2.准备冻存液比例:50%FBS+40%培养基+10%DMSO(现用现配)
3.加1.5冻存液在离心管中,将细胞吹打均匀,移入冻存管内.
放入-20度冰箱2-4小时后.再放入-80度冰箱过夜,第二天放入液氮罐保存
原则  慢冻速溶
4.加1.5冻存液在离心管中,将细胞吹打均匀,移入冻存管内。
冻存时间。放入4度冰箱10分钟。再放入-20度冰箱30分钟-1小时。不能超过1小时。zui后放入-80度冰箱过夜。第二天放入液氮中。

SMC-1胸膜细胞瘤

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