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人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA试剂盒

时间:2013-11-4阅读:95
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人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA试剂盒操作步骤

  1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

160μg/ml

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

80μg/ml

4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

40μg/ml

3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

20μg/ml

2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

10μg/ml

1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

 

 

  1. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  2. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 
  3. 人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA试剂盒 
  4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
  5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
  7. 温育:操作同3。
  8. 洗涤:操作同5。
  9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
  10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
  12. 测定应在加终止液后15分钟以内进行.人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA试剂盒
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