鸡 (Chicken) 白细胞介素-2（IL-2）ELISA 检测试剂盒*

鸡 (Chicken) 白细胞介素-2（IL-2）ELISA 检测试剂盒

本试剂仅供研究使用  标本：血清或血浆

试验原理：

IL-2试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知IL-2浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将IL-2和*标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IL-2的浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制

试剂盒成份（2-8℃保存）

96孔配置

48孔配置

配制

96/48人份酶标板

1块板（96T）

半块板（48T）

即用型

塑料膜板盖

1块

半块

即用型

标准品：800pg/ml

1瓶（0.6ml）

1瓶（0.3ml）

按说明书进行稀稀

空白对照

1瓶（1.0ml）

1瓶（0.5ml）

即用型

标准品稀释缓冲液

1瓶（5ml）

1瓶（2.5ml）

即用型

*标记的抗IL-2抗体

1瓶（6ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

亲和链酶素-HRP

1瓶（10ml）

1瓶（5.0ml）

即用型

洗涤缓冲液

1瓶（20ml）

1瓶（10ml）

按说明书进行稀释

底物A

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

底物B

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

终止液

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

自备材料

蒸馏水。
加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。

安全性

避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项

试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法

血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

试剂的准备

标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：

800 pg/ml

（6号标准品）

原倍浓度不用稀释直接加入50ul。

400 pg/ml

（5号标准品）

100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液

200 pg/ml

（4号标准品）

100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液

100 pg/ml

（3号标准品）

100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液

50 pg/ml

（2号标准品）

100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液

25 pg/ml

（1号标准品）

100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液

0 pg/ml

（空白对照）

原始浓度不用稀释直接加入50ul。

洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

操作步骤

使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。

建议使用的实验方案

标准品浓度（pg/ml）

A

800

800

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

B

400

400

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

C

200

200

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

D

100

100

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

E

50

50

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

F

25

25

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

G

0

0

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

H

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

样品

局限

6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。

试剂盒性能

1. 灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

结果 判 断 与 分 析

1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的IL-2标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的IL-2含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围：0-800pg/ml

4、敏感度： 1.0 pg/ml

人羰基化蛋白(PC)ELISA试剂盒
人磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA试剂盒
人桩蛋白(Pax)ELISA试剂盒
人小乳腺表皮粘蛋白(SBEM)ELISA试剂盒
人类似60S核糖体蛋白L21(LOC382344)ELISA试剂盒
人类粘蛋白2(ORM2)ELISA试剂盒
人MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA试剂盒
人水闸蛋白14(CLDN14)ELISA试剂盒
人可溶性半乳糖苷结合凝集素3(Lgals3)ELISA试剂盒
人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA试剂盒
人泛素蛋白D(UBD)ELISA试剂盒
人toll样受体2(TLR2)ELISA试剂盒
人青少年2型血色素沉着症/幼年型血色病相关蛋白2(HFE2)ELISA试剂盒 
人卷曲蛋白8(FZD8)ELISA试剂盒
人蜗牛同源物2(SNAI2)ELISA试剂盒
人高尔基蛋白73(GP-73)ELISA试剂盒
人TU3A蛋白(TU3A)ELISA试剂盒
人电子转移黄素蛋白β肽(ETFB)ELISA试剂盒
人皮肤蛋白(DPT)ELISA试剂盒
人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)ELISA试剂盒
人降解加速因子(DAF)ELISA试剂盒
人T细胞活化连接蛋白(LAT)ELISA试剂盒
人SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)ELISA试剂盒
人B细胞连接蛋白(BLNK)ELISA试剂盒 
人尿素酶相关蛋白C(UreC)ELISA试剂盒
人衔接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA试剂盒 
人锚蛋白B(Ank-B)ELISA试剂盒
人潜伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA试剂盒
人重组激活基因2(RAG-2)ELISA试剂盒 
人重组激活基因1(RAG-1)ELISA试剂盒
人NOD样受体(NLR)ELISA试剂盒
人*诱导基因/RIG-1样受体(RLR)ELISA试剂盒 
人清道夫受体B(SRB/CD36)ELISA试剂盒
人杀菌肽B(CecB)ELISA试剂盒 
人抗菌肽(Att)ELISA试剂盒 
人颗粒溶素(GNLY)ELISA试剂盒 
人富组蛋白(HTN5)ELISA试剂盒
*样转录体受体(ILTsR/LIR/CD85)ELISA试剂盒
人丝狀血球凝集素(FHA)ELISA试剂盒
人细胞绒毛蛋白/埃兹蛋白(CVL)ELISA试剂盒
人嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)ELISA试剂盒
人肌养蛋白(dystrophin)ELISA试剂盒
人胶原凝集素(Collectin)ELISA试剂盒
人伴侣蛋白10(CPN10)ELISA试剂盒
人纤调蛋白(FMOD)ELISA试剂盒
人钙网蛋白(CRT)ELISA试剂盒
人网膜素(omentin)ELISA试剂盒
人基质γ羧基*蛋白(MGP)ELISA试剂盒 
人基质裂解蛋白/基质溶素(MAT)ELISA试剂盒 
人螺旋肽(THP)ELISA试剂盒
人溶酶体相关膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA试剂盒 
人软骨糖蛋白39(HC gp-39)ELISA试剂盒 
人不透光相关蛋白(OPAs)ELISA试剂盒 
人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA试剂盒
人多聚血清蛋白(PHSA)ELISA试剂盒 
人胞浆免疫球蛋白(CIg)ELISA试剂盒 
人纤维介素蛋白(fgl2)ELISA试剂盒 
人泛素蛋白(Ub)ELISA试剂盒 
人类粘蛋白(ORM)ELISA试剂盒
人弹性蛋白(ELN)ELISA试剂盒
人套膜蛋白(iNV)ELISA试剂盒
人肌腱蛋白R(TN-R)ELISA试剂盒
人生长相关蛋白43(GAP-43)ELISA试剂盒
人cAMP反应元件结合蛋白(CREB)ELISA试剂盒
人聚集蛋白(Agrin)ELISA试剂盒
人Agouti相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒
人膜辅蛋白(MCP/CD46)ELISA试剂盒 
人延伸蛋白A(EloA)ELISA试剂盒
人酰化刺激蛋白(ASP)ELISA试剂盒 
人杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA试剂盒 
人细胞外基质磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA试剂盒 
人复制蛋白A(RPA-70)ELISA试剂盒 
人软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒 
人抗原提呈相关转运蛋白/T细胞活化蛋白(TAP)ELISA试剂盒