连接粘附分子1,JAM1/CD321,
产品类型 一抗
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我公司*供应免疫组化抗体、WB抗体、免疫组化试剂盒和抗体试验所需全部相关试剂、荧光标记抗体、elisa抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、各种标记的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研实验抗体,欢迎新老客户订购。
连接粘附分子1,JAM1/CD321,Western的经验:
1.关于反复标记和再标记:一张膜上可以同时标记很多抗体,但要注意,一般在两个目的蛋白相差在5KD以上的,先后两个抗体是不同的二抗.在两个目的片段相差小于5KD时,就需要经过处理,再标记了(Re-Blot),有些公司有再标记的现成试剂,不过比较贵,zui简单的方法是:ddH2O洗5分钟,0.2MNaOH5分钟,再用ddH2O5分钟*3次,然后可以再标记了.要做多个抗体的膜\的选择,用PVDF或教坚固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一张膜上做个10个不同的抗体.
2.关于转膜时的温度:转膜时的温度比较重要,保持在10度以下,可以用冰浴(Pharmacia的转膜装置),也可以在转膜液中放入合适的事先准备的冰袋(-70度>3小时)(Bio-Rad),这样既可以降温又可以节约Buffer.
3.关于三名治:本人以前做时花很多时间在防止短路上,现在我做的时候根本没有剪齐,zui主要的是赶气泡,这是关键的关键,其实转膜的原理是电流的单向流动,现在的好多公司的转膜装置的电极是一个平面,所以不用担心短路的.(不信的可以试试!!)
4.关于转膜电流和时间:一般转膜的电流在200mA-400mA之间时间为1小时,大片段的>50KD的可以选用350mA,小片段的可以用250mA,不过本人觉得上述电流均能很好的把大部分蛋白转过去.
5.用脱脂奶粉封闭的效果不一定比用BSA差,不过我们试过几种奶粉,有一些奶粉不太适合.*使用的奶粉:雀巢高钙奶粉,多力精低脂奶粉.一般国产的奶粉,部分相关产品:
Ys-3651R 连接粘附分子1 JAM1/CD321
Ys-2678R 转录接头蛋白EP300抗体 p300/KAT3B
Ys-1837R 钾电压阀门通道混合器相关亚家族成员5抗体 KCNA5
Ys-2886R 钾离子通道蛋白G蛋白4抗体 KCNG4/KV6.3
Ys-3656R 钾电压阀门通道混合器相关亚家族成员7抗体 KCNA7
Ys-3648R 胞质接头蛋白Keap1抗体 KEAP1
Ys-2130R Ki67蛋白抗体 Ki-67 (Proliferation Marker)
Ysm-1590M Ki-67单克隆抗体 Ki-67 (Proliferation Marker)
Ys-2494R 驱动蛋白家族Member14蛋白抗体 Kif14 protein
Ys-3527R 驱动蛋白家族KIF17抗体 KIF17
Ys-0749R 肿瘤转移抑制基因抗体 Kiss-1
Ys-1064R 肠道内富含的Kruppel样因子/上皮锌指蛋白4抗体 Klf4
Ys-3615R 肠道内富含的Kruppel样因子5抗体 KLF5
Ys-2019R 磷酸化Kinesin 5B抗体 phospho-Kinesin 5B (Ser272)
Ys-2020R Kinesin 5B抗体 phospho-Kinesin 5B (Ser275)
Ys-2772R 肺Kruppel样因子抗体 KLF2
Ys-1395R 转染抑癌基因KLF6抗体 KLF6
Ys-3649R KLF样转录因子8抗体 KLF8
Ys-3644R 转录因子KLF9抗体 KLF9
Ys-1577R 肠道内富含的Kruppel样因子13 KLF13/RFLAT-1
Ys-0225R 血蓝蛋白抗体 KLH
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