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干细胞无血清冻存液操作事项

阅读：1287发布时间：2014-5-12

使用说明：

1. 细胞消化和计数，用*对待冻存的细胞进行消化，并对细胞进行计数。

2. 1000转/min离心5分钟（4℃），去掉上清。

3. 根据细胞计数的情况，加入适量的干细胞无血清冻存液，使细胞密度在1×10⁶左右（或根据自己希望达到的细胞密度）。

4. 轻轻地重悬细胞（务必重悬均匀）。

5. 将重悬的细胞按等份加入到灭菌的冻存管（需提前做好标记或者贴上标签）中，旋紧冻存管盖。

6. 将冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒直接放入-80℃。

7. 第二天将细胞从-80℃转移到液氮中。

注意事项：

● 用处于对数生长期的细胞进行冻存。

● 控制好*的消化时间，切记消化过度，会影响复苏效果。

● 重悬细胞的过程中，请务必要轻柔，以免损伤细胞，但同时也一定要充分重悬，这样细胞在复苏时才不会成团。

● 细胞操作请注意无菌。

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