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ELISA为什么所有孔都*没颜色

阅读：1683发布时间：2014-12-15

ELISA自己包被抗体—封闭—加样—二抗—HRP—TMB显色，上述步骤应该是对的，为什么所有孔都*没颜色.

做了6次了，怎么知道是哪一步出问题了，全是阴性？你的试验想检测什么？检测抗原？检测抗体？你这个实验思路问题很大。
你自己先固定抗体，加样，是不是加抗原？再加二抗，请问，加不加这个样，也就是加不加这个抗原，影响实验结果吗？酶标二抗是和抗体结合的。还有你的二抗和一抗之间中间隔了个抗原，二抗还能和抗体结合吗？

是想检测抗原的，固定的一抗可以和抗原反应，同时也能和酶标二抗反应，不存在有东西隔在中间的情况。这个实验思路是标准的啊，教科书上都是这么做的。

你这个实验是不是，出现阴性结果，就是样品是阳性？
我解释一下，你实验出现的问题：固定一抗，直接加酶标二抗，二抗结合上去，酶也结合上去，冲洗，去掉未结合的酶标二抗，加显色剂，阳性。固定一抗，加抗原反应。加酶标二抗，如果抗原不影响酶标二抗和抗体结合的话，酶标二抗和一抗结合，冲洗未结合的二抗，加显色剂，阳性。
那么，请问，加不加抗原，结果有什么不同？只有你的方法的结果是阴性的，才有说服力，不过靠阴性反应来确定抗原是不是存在，有点不靠谱。

如需购买抗体可我公司销售人员或咨询我公司在线客服。

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