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培养基的加热灭菌

阅读:487发布时间:2014-12-29

培养基在做加热灭菌前,培养基(尤其是琼脂培养基)的成分应该边搅拌边溶解于水中。

高压灭菌的时间取决于培养基中的微生物的含量、容器的大、小,每个容器中物质的体积和灭菌锅内容器的空间。在制备培养基时,由于污染的微生物的含量通常较低,所以会影响到高压时间的主要变量取决于其他的几个因素。灭菌时间 通常要在121下保持15~20min,这个时间从中心温度达到121开始计算。可以将热电偶放入灭菌锅内部中心进行测定。lOOmL的瓶子或烧杯单独放在髙压锅中达到121大约需要10min,如果多个瓶子紧挨着放满灭菌锅内的丝悬筐中,瓶子中的物质需要 20min才能达到121如果培养基或稀释液的体积很大时,则需要更长的时间;例如单独使用1L的瓶子温度达到121时需要20min,如果许多这样的瓶子紧挨着放满灭菌锅 内的丝悬筐中,则中心温度要达到121需要30mm或更长的时间。很明显,为了达到灭 菌的目的,对培养基和稀释液进行高压灭菌时,惟一正确的方法是将热电偶放入灭菌锅中测定。

当培养基分装在大的容器(1L或更大时)中时,可能会因为延长灭菌加热时间而造成 热降解。因此在高压灭菌前,先将培养基成分溶解后分装到较小的容器中(如装入 100ml带螺帽的浅试剂瓶中)


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