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滴加抗体注意事项

阅读:406发布时间:2015-9-21

在做实验之前必须确定确定试剂盒样本是否收集完成,样本收集量以及保存情况,样本是否出现溶血情况,准备实验前是否做好序号标记情况。因为每次实验前应列出详细实验计划,其中包括实验目的、拟用方法、所用一抗和二抗的种类和效价、预实施的操作流程方案以及预期实验结果等。实验分组编号用玻璃笔标记在玻片上,对每一抗体均应配以阳性和阴性对照。以下关于滴加抗体操作注意事项作出详细讲解。

      切片在血清封闭后,倾去多余血清,便可滴加*抗体。滴加前取出玻片,用吸水纸拭去组织周围的液体,组织与细胞表面的液体要用滤纸条轻轻吸掉,但注意勿使 组织干燥,尽快滴加抗体工作液1(50ul)于组织表面。由于切片周围无液体,滴加的抗体成为一个液滴,这样既可节省抗体,又可增加抗原与抗体结合的 机会。如果玻片上是培养细胞,应在镜下选择一个理想的区域用免疫组织化学油笔在此区域外围画一圆圈,再滴加抗体,尔后应轻轻摇动切片数秒,以促进抗体与组 织待测抗原的结合,避免假阴性小区的出现。这一操作过程虽然简单,却十分重要。加抗体时切忌加样器或吸头碰到组织或细胞,以免造成破损。


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