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新生牛血清的病毒检查方法

阅读：399发布时间：2016-3-14

    新生牛血清从出生14小时内未进食的新生牛采血分离血清，经除菌过滤后制成。牛血清生产过程中不得任意添加其他物质成分。

　　新生牛血清的病毒检查  

　　1. 细胞培养法  

　　（1）非血吸附病毒检查  

　　将新生牛血清供试品分别接种到人源（如*）、猴源（如Vero细胞）以及牛肾传代细胞三种细胞，采用的牛肾传代细胞系应证明无牛病毒的污染。每种细胞至少接种6瓶，每瓶细胞悬液接种量不少于培养液总量的25%。于36±1℃培养21天。接种的每种细胞都应同时设立牛血清阴性对照和病毒阳性对照，阴性对照用牛血清应证明无牛病毒污染。

　　培养过程中可根据细胞生长情况更换细胞培养液，每次更换培养液前应观察（肉眼/显微镜）有无细胞病变出现。培养到期后，阴性对照应无任何细胞病变出现，阳性对照应出现典型的细胞病变，试验成立。供试品检查应不出现任何细胞病变为阴性，符合要求。 

　　（2）血吸附病毒检查  

　　将上述接种供试品的每种细胞取2瓶进行血吸附病毒检查。用0.2%~0.5%鸡和豚鼠红细胞混合悬液覆盖于细胞表面，置2~8℃分钟，然后置20~25℃30分钟，分别进行镜检，观察红细胞吸附情况， 供试品检查结果均应为阴性。试验同时应设立血吸附阳性对照。 

　　2. 免疫荧光抗体检查法  

　　采用直接或间接免疫荧光抗体检查法，至少应对牛腹泻病毒，牛腺病毒、牛细小病毒、呼肠孤病毒、狂犬病病毒以及牛副流感病毒进行检查，结果均应为阴性。

 


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