异硫氰酸荧光素是一种荧光试剂，发射绿色荧光。该分子中含有活泼的异硫氰酸基团，易于与蛋白质等分子反应，常用于蛋白质的荧光标记等。 能与抗体结合的一种荧光指示剂。用于荧光显微镜观察。
异硫氰酸荧光素纯品为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水和酒精溶剂。有两种异构体，其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性与蛋白质结合力等方面都更优良。FITC分子量为389.4，zui大吸收光波长为490～495nm，zui大发射光波长为520～530nm，呈现明亮的黄绿色荧光。
异硫氰酸荧光素在冷暗干燥处可保存多年，是目前应用zui广泛的荧光素。其主要优点是人眼对黄绿色较为敏感，通常切片标本中的绿色荧光少于红色。 FITC能和各种抗体蛋白结合，结合后的抗体不丧失与一定抗原结合的特异性，并在碱性溶液中具有强烈的黄绿色荧光。通过在荧光显微镜下观察或流式细胞仪分析可对相应抗原进行定性、定位或定量的检测。用于医学，农学和畜牧等方面，可对由地细菌病毒和寄生虫等所致疾病进行快速诊断。
异硫氰酸荧光素标记抗体流程：
（1）将待交联的蛋白（浓度≥1mg/ml）对交联反应液透析三次4℃，至pH＝9.0。交联反应液配制方法：7.56g NaHCO3，1.06g Na2CO3，7.36g NaCl，加水定容至1 L。
（2）将FITC溶于DMSO中，浓度为1mg/mL。每次交联使用的FITC均应新鲜配制，避光。
（3）按P:F（蛋白质:FITC）=1mg:150μg 的比例将FITC缓慢加入于抗体溶液中，边加边轻轻晃动使其与抗体混合均匀，暗处4 ℃反应8 h。
（4）加入5mol/L的NH4Cl至终浓度50mmol/L， 4 ℃终止反应2 h。
（5）将交联物在PBS中透析四次以上，至透析液清亮。
（6）交联物的鉴定
蛋白浓度（mg/mL） = [ A280– 0.31×A495 ] / 1.4
F/P比例: 3.1×A495 / [A280 – 0.31×A495 ]，该值应介于2.5 ~ 6.5之间。
（7）FITC交联的蛋白应置于pH 7.4的磷酸盐缓冲液中，加入0.1% NaN3、1% BSA，4℃避光保存。
