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技术文章

脂肪干细胞的培养方法

阅读:1537发布时间:2017-6-1

脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是近年来从脂肪组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的干细胞。研究发现ADSCs细胞能够在体外稳定增殖且衰亡率低,同时它具有取材容易、少量组织即可获取大量干细胞,适宜大规模培养,对机体损伤小等优点,而且其来源广泛,体内储备量大,适宜自体移植,逐渐成为近年来新的研究热点之一。

培养方法:

    将脂肪组织冲净,称重后消化。当消化完成后,弃掉上层未消化的脂肪组织,将下层的细胞悬液以1500 r/min(375g),离心10 min 后弃上清,得到离心管底部的脂肪干细胞团,将其重悬,密度调整到1×105mL-1,然后接种在培养面积为25 cm2 的细胞培养瓶中。

    当干细胞长满培养瓶后按一传二进行传代,具体的传代方法是:首先,用D-Hanks 冲洗一遍细胞,然后加入2 mL 的混合酶溶液(0.25%*和0.02%EDTA)消化,当在显微镜下观察到细胞发生明显的变形,缩成球状后,立即用含有10%胎牛血清的培养基中止消化,并用吸管轻轻吹打瓶底部,确保细胞*脱落分离到悬液中,再把细胞悬液置于离心机上,以1000 r/min (167g),离心5 min。zui后,将离心得到的细胞团重悬,调整密度为合适密度进行接种。


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