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关于ELISA试剂盒的操作秘密

阅读：1140发布时间：2018-5-17

常有ELISA实验操作者抱怨实验复杂，而经验丰富的老师们会觉得很简便，一是熟能生巧，二是掌握了其中的秘密。今天为大家介绍ELISA试剂盒的操作秘密吧：

一、 ELISA试剂盒操作秘密重点之加样：　　

在ELISA试剂盒中除了包被外，一般需进行45加样。在定性测定中有时不强调加样量的准确性，此时应该使用相同口径的滴管，保持准确的加样姿势，使每滴液体的体积基本相同。在定量测定中则加样量应力求准确。标本和结合物的稀释液应按规定配制。加样时应将液体加在孔底，避免加在孔壁上部，并注意不可出现气泡。

二、ELISA试剂盒操作秘密重点之保温：　　

在ELISA试剂盒中一般有二次抗原抗体反应，即加标本后和加结合物后，此时反应的温度和时间应按规定的要求，保温容器zui*是水浴箱，可使温度迅速平衡。各ELISA板不应叠在一起。为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿纱布的湿盒中。湿盒应该是金属的，传热容易。

三、ELISA试剂盒操作秘密重点之洗涤：　　

洗涤在ELISA试剂盒过程中不是反应聚，但却是决定实验成败的关键。洗涤的目的是洗去反应液中没有与固相抗原或抗体结合的物质以及在反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰物质。洗涤如不*，特别在zui后一次，如有酶结合物的非特异性吸附，将使空白值升高。另外，在间接法中如血清标本内的非特异性IgG吸附在固相上而未被洗净，也将与酶标抗体作用而产生干扰。

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