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上海沪宇生物科技有限公司
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阅读:567发布时间:2018-6-4
zui近在做血清ELISA,重复了很多次,结果每次结果的背景值都很高,OD值达到0.6,很头疼,尝试过用封闭液稀释抗体和血清,也尝试过重重拍板拍干,结果均无济于事!希望我司技术帮忙解决。根据我们的技术探讨得出以下几点:
ELISA试剂盒不正确的洗涤:洗涤不充分或漏洗都有会导致背景高。核对ELISA洗液的量并确保所有洗涤步骤都完成;确保eBioscience ELISA洗液被用并稀释正确。让洗液在孔里至少停留15-30s。
ELISA试剂盒底物被污染: 底物溶液自身是没有颜色的,确保底物在用之前没有被金属离子或氧化试剂污染。
ELISA试剂盒稀释液被污染:大部分ELISA稀释液是蛋白基质,*次打开后就有可能已经被污染了,必须用无菌的移液管从瓶底移取使用。
ELISA试剂盒底物曝光:底物曝光可能会变蓝,解决办法就是使用前保存在棕色瓶里。
ELISA试剂盒偶联物稀释有误:确保偶联物稀释按照说明书的要求,偶联物浓度太高有可能导致高背景。
ELISA试剂盒孵育时间和温度不对:孵育时间和温度严格按照ELISA操作流程规定。
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