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ELISA实验中样本的收集方法

阅读:519发布时间:2018-11-16

    在收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。新鲜标本应尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,应及时储存在4℃备用。如因特殊原因需要定期、多次收集标本,请取材后,将标本及时分装后放在-20℃或以下条件下保存。由于蛋白样品多不稳定,极易降解,应避免反复冻融,以减少对实验的影响。今天我们和大家分享ELISA实验中样本的收集方法:

一、液体类标本,液体类标本包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

3.尿液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(pH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

二、组织标本:采集标本后,称取组织净重,用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后要保存在2-8℃的温度,加入一定量的PBS(pH7.2-7.4),用手工或电动匀浆器将标本充分匀浆。4℃离心(10000-15000转/分)10-20分钟。收集上清,留取适量检测,其余冷冻保存备用。

备注:如果样本中的待检物需要提纯,请客户自行处理。


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