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上海沪宇生物科技有限公司
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阅读:284发布时间:2017-4-14
甲胎蛋白(AFP)在临床上作为肝细胞癌的诊断以及疗效观察指标已经被广泛认可, 但是 AFP 只具有相对特异性,即肝癌患者中 AFP 升高,部分良性肝病患者中也升高,因此,寻求肝癌早期诊断特异性指标具有重要临床意义。研究发现, AFP 在不同病理情况下产生的分子糖链结构不同,肝癌病理情况下主要产生与小扁豆凝集素具有强结合力的甲胎蛋白异质体(AFP-L3),本研究采用亲和微量离心柱法分离 AFP-L3,应用电化学发光法对不同肝病患者总AFP 和 AFP-L3 进行检测,探讨 AFP-L3 在鉴别良恶性肝病中的应用价值。
测定方法:AFP-L3 的分离采用亲和微量离心柱法, 柱内预先装有耦联了小扁豆凝集素的琼脂糖,可特异性地结合AFP-L3,当血清流过离心管时,样本中的 AFP-L3 与管内亲和介质结合,经过清洗和离心洗脱过程,获得含有 AFP-L3的样本,然后用电化学发光法检测总 AFP 和 AFP-L3 的含量,计算AFP-L3 占 AFP 总量的百分比,AFP-L3/AFP跃10%为阳性判断标准。
目前肝癌的诊断主要依靠 AFP,但AFP在一些良性肝病患者中也会有不同程度的升高。因为在肝细胞再生过程中会产生一定量的AFP。
本研究结果显示,AFP逸400滋g/L和AFP约400滋g/L 的肝癌组其总AFP-L3/AFP 阳性率明显高于非肝癌组,差异有统计学意义,表明用本方法检测的 AFP-L3/AFP > 10%为诊断指标时,可以有效的区分良、恶性肝病患者;而低浓度AFP阳性肝癌组与高浓度AFP 阳性肝癌组相比,其 AFP-L3 阳性率差异无统计学意义,表明AFP-L3 用于肝癌诊断不受AFP逸400 滋g /L作为肝癌诊断标准的限制,如果患者血清中总AFP 只有轻微升高,而AFP-L3 所占比例超过10%,就提示肝癌发生的可能性较大。对这样的患者进行随访和严密监控是很有必要的。笔者同时对非肝癌患者之间 AFP-L3/AFP 阳性率进行比较,结果显示差异均无统计学意义。
目前AFP-L3 检测方法主要有植物凝集素亲和层析法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法、亲和印迹法及亲和免疫交叉电泳技术等。这些方法技术要求较高,操作繁琐,限制了AFP-L3 在临床的应用。本研究采用亲和微量离心柱法,柱内预先装有耦联了小扁豆凝集素的琼脂糖作为亲和介质,然后利用半抗原糖基进行特异性洗脱,并结合离心技术,可快速简便获得样本中的 AFP-L3, 然后用电化学发光法 检测总 AFP 和AFP-L3 的含量, 方法简单、结果准确、成本较低,适合临床推广应用。对于低浓度AFP阳性而AFP-L3 所占比例超过10%的肝病患者,定期复查 AFP-L3,动态观察其变化,可及时发现某些肝病的恶变倾向,对肝癌的早期诊断意义较大。
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