一、原理

在pH8.6的琼脂凝胶中，抗体球蛋白只带有微弱的负电荷，在电泳时，由于电渗作用的影响，抗体球蛋白不但不能抵抗电渗作用向正极移动，反而向负极倒退。而一般抗原蛋白质带负电荷，将抗原置于负极，将血清抗体置于正极，电泳后则在两孔之间相遇，并在比例适当的部位形成肉眼可见的沉淀线。

本法由于抗原抗体分子在电场作用下定向运动，限制了自由扩散，增加了相应作用的抗原抗体的浓度，从而提高了敏感性，它较琼脂扩散敏感性高10～16倍。本法快速、操作简单。

二、试剂

同免疫电泳。

三、操作方法

1．制琼脂板 以pH8.6离子强度0.05*缓冲液配成1%～1.5%琼脂凝胶板，厚度2mm～3mm。

2．打孔 琼脂冷却后，按图打孔，打成对的小孔数列，孔径0.3cm～0.6cm，孔距0.4cm～1.0cm。挑去孔内琼脂，封底。

3．加样 一对孔中，一孔加已知（或待测）抗原，另一孔加待测（或已知）抗体。

4．电泳 将抗原孔置于负。电压2.5V/cm～6V/cm，或电流强度3mA/cm～5mA/cm，电泳时间30min～90min。

四、观察结果

断电后，将玻板置于灯光下，衬以黑色背景观察。阳性者则在抗原抗体孔之间形成一条清楚致密的白色沉淀线。如沉淀线不清晰，可把琼脂板放在湿盒中37℃数小时或置电泳槽过夜再观察。

五、注意事项

1．抗原抗体浓度的比例 当抗原抗体比例不适合时，均不能出现明显可见的沉淀线。所以除了应用价的血清外，每份待测样品均可做几个不同的稀释度来进行检查。

2．特异性对照鉴定 为了排除假阳性反应，则在待检抗原孔的邻近并列一阳性抗原孔，若待检样品中的抗原与抗体所形成的沉淀线和阳性抗原抗体沉淀线*融合时，则待检样品中所含的抗原为特异性抗原。

3．适当的电渗作用在对流免疫电泳中是必要的。当琼脂质量差时，电渗作用太大，而使血清中的其它蛋白成分也泳向负极，造成非特异性反应。在某些情况，琼脂糖由于缺乏电渗作用而不能用于对流免疫电泳。

4．当抗原抗体在同一介质中带同样电荷或迁徙相近时，则电泳时两者向着一个方向泳动。故不能用对流免疫电泳来检查。上海友腾生物倾力为客户提供上万种科研试剂，提供*、zui全、zui有效的科研试剂产品，质量被全国各大院校科研机构认可。
 郑重声明：请客户在取材前尽量先与我公司销售技术人员沟通，前期的取材直接影响到您的实验结果。我们有成套的售前售后服务，.凡是购买公司试验用产品，本公司无偿提供。凡是购买本公司elisa试剂盒，本公司免费代测，产品耐用，性价比好，值得信赖。
服务承诺：1.凡在本司购买elisa试剂盒的客户，可享受我司提供免费代测服务及中英文双版说明书
          2.我司对售出产品提供完整售后服务,本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!
本公司*供应科研用elisa试剂盒，价格合理，确属质量问题可包换包退，免除您的后顾之忧。，如有问题可与我司业务员!我们会以zui快的速度为你解决一切问题，
提供各种种属、各种系列ELISA试剂盒，于实验室科学研究用，不适用于临床诊断。提供免费代测服务，详情请您。 传真  手机