人Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)ELISA Kit 

标本的稀释原则： 
    首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。zui后计算浓度时，稀释了“N”倍，标本的浓度应再乘以“N”。 
    标准品的稀释原则：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为300 pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。 
    如配制150 pg/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 
    *标记抗体的稀释原则： 
    临用前以*标记抗体稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl*标记抗体加990μl*标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。 
    辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则： 
    临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100μl），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。 
    操作注意事项： 
    ● 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。 
    ● 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。 
    ● 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 
    ● 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。 
    ● 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 
    ● 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。 
    ● 加入试剂的顺序应*，以保证所有反应板孔温育的时间一样。 
    ● 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 
    试剂盒组成 
    130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶 
    2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（16ng/L）0.5ml×1瓶 
    3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶 
    4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份 
    5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张 
    6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个 
    标本要求 
    1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
    2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性
检测方法：酶联免疫法/酶免法（ELISA） 
    操作注意事项 
    1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。 
    2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。 
    3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 
    4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。 
    5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品 
    6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 
    7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。 
    8． 加入试剂的顺序应*，以保证所有反应板孔温育的时间一样。 
    9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作,
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