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人军团菌抗体 IgM(LP-IgM)说明书

时间:2014/7/21阅读:554
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人军团菌抗体 IgM(LP-IgM)说明书

实验原理:
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人军团菌抗体IgM(LP-IgM)水平。用纯化的抗原
包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入军团菌抗体IgM(LP-IgM),再与
HRP 标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过*洗涤后加底物TMB 显色。
TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样
品中的军团菌抗体IgM(LP-IgM)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),
通过标准曲线计算样品中人军团菌抗体IgM(LP-IgM)浓度。

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3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液:将30(48T 的20 倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T 的20 倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此
重复5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。

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