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人成纤维细胞激活蛋白(FAP)定量检测方法

时间:2014-8-11阅读:618
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人成纤维细胞激活蛋白(FAP)定量检测方法 采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被人成纤维细胞激活蛋白(FAP)多克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物AB,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中人成纤维细胞激活蛋白(FAP)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中人成纤维细胞激活蛋白(FAP)含量。

 

人成纤维细胞激活蛋白(FAP)定量检测方法

【注意事项】

1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。

2酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。

3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。

4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。

5、本试剂盒定量范围为0.312-80ng/ml,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(0.312-80ng/ml范围内),乘以总稀释倍数即为样本zui终浓度。

6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。

7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、*和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜

8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。

9、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。

人成纤维细胞激活蛋白(FAP)定量检测方法

 

人成纤维细胞激活蛋白(FAP)定量检测方法

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