【中文名称】:流行性腮腺炎病毒IgG抗体 ELISA试剂盒
【英文名称】:Mumps virus IgG antibody ELISA kit
【产品规格】:96T/48T
【保存条件】:2-8℃低温保存
【保质期】:6个月,所有试剂盒均提供批次。
【试剂盒成分】:酶标板,试剂,标准品等。
用于科研方面,不用于临床诊断
流行性腮腺炎病毒IgG抗体 ELISA试剂盒注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温均衡15-30分钟后方可运用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并常常校对其准确性,以避免实验误差。一次加样时日控制在5分钟内,如标本数量多,举荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样板OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释必定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免穿插污染。
操作步骤
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1200pg/ml,800pg/ml ,400pg/ml,200pg/ml,100pg/ml)。
2. 加样:分别设空白孔(空白比照孔不加样品及酶标试剂,其他各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不涉及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序丈量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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