人γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒
ELISA试剂盒的基本原理就是将抗原抗体固定到特定的载体上进行反应,并通过酶催化底物发生化学变化将抗原抗体反应通过颜色的形式显现出来。
(1)将抗原抗体反应固相化:即试验中的包被环节,使抗原或抗体吸附于固相载体表面。其机制可能是聚苯乙烯表面间的疏水基团可以无选择性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不破坏蛋白分子结构,保持其生物学特性和免疫学活性;
(2)封闭:固相吸附蛋白是非特异性的,在包被目的免疫蛋白后,未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力,为了保障抗原抗体反应的特异性,因此,包被剩余的固相表面应该用抗原抗体反应无关蛋白封闭。一般认为牛血清白蛋白是zui为理想的封闭剂,也可用脱脂奶粉、明胶、牛血清替代。
(3)抗原抗体反应:抗原或抗体在适当的介质下可进行特异的抗原抗体反应。 (4)酶反应:酶可以通过共价键与抗原或抗体连接形成结合物,当抗原抗体反应的时候,被检测靶目标中也结合了酶分子。
(5)ELISA试剂盒底物反应:结合在抗原抗体中的酶分子,可以促使底物发生颜色反应,检测人员可以裸眼观察,可以通过颜色来判定是否有免疫反应的存在,通过颜色的深浅判断标本中相应抗原或抗体的含量,也可借用酶标仪在适当的波长读取吸光度值。
人γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒的优势:
全面——混合8种不同的常见抗原,对自身免疫性疾病进行全面筛查。
快速——检测时间短(~2小时),确诊时间更早。
准确——ELISA检测方法,灵敏度高,特异性强,适用性好。
质优——*开发,高品质及高可靠性的分析性能。
价低——国内自生产,符合国内实情,降低生产成本
标本的采取和保存
可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗人γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。
采取措施,避免差错事故的发生:创造一个良好的工作环境,实验窄工作人员应团结友爱,相互关心,相互学习,处在一个融洽和谐的氛围中,自然心情舒畅,工作情绪高涨。再就是建立完善的质量保证体系,在操作过程中时刻注意,将质控贯穿到整个实验过程,包括标本的采集与处理、操作过程、检验结果的审核、结果的登记与保存、报告单的发放等一系列的制度,明确责任,错误的结果还是能够避免发生的。
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