李斯特氏菌显色培养基
Listera Chromogenic Medium
用途：用于李斯特氏菌的显色培养，单增李斯特氏菌显蓝色，外围有一不透明环
李斯特氏菌显色培养基可快速检测食品和药品中单增李斯特氏菌。阴性结果可在 3 天内检测完成。单增李斯特氏菌显蓝色，菌落周围有一不透明环。蛋白胨提供氮源和氨基酸，氯化钠维持渗透压，琼脂是凝固剂，氯化锂抑制革兰氏阴性菌生长，抑菌剂抑制除李氏菌外的革兰氏阳性菌生长。
成份 (g/L)
基础培养基：
| 营养物质 | 70.0 |
| 显色剂 | 1.0 |
| pH 7.2 ± 0.2 25 ℃ |
李斯特氏菌添加剂 6.0g
李斯特氏菌抑菌剂 1 1ml*5 支
李斯特氏菌抑菌剂 2 1ml*5 支
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得*的结果。
注意
此培养基仅供实验室使用。
李斯特氏菌显色培养基用法
称取基础培养基 14.2g 加入 180ml 蒸馏水，加热溶解并不停搅拌；另取 1.2g 李斯特氏菌添加剂，加入 20ml 无菌水，并加入一些玻璃球，不停振动，使其乳化均匀，将二者分别于 121 ℃高压灭菌 15 min 。冷至 50 ℃左右时，把李斯特氏菌添加剂加入基础培养基中，并加入李斯特氏菌抑菌剂 1 和 2 各 1 支，混匀，倾入无菌平皿。使培养基的厚度约为 5mm ，这样有利观察不透明环。
李斯特氏菌显色培养基贮存
制备好的固体平板保存于 2-8 ℃，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处， 保存温度 2-8 ℃
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤
使用前，把制备好的培养基放置室温 10-20 分钟。
1 、按 SN 标准、 GB 标准、 FDA 标准、 ISO 标准或其它标准制备样品液；
2 、把 25g 样品液加入 225mlEB 增菌液中 30 ℃培养 48 小时；或把样品液和 Half-Fraser 增菌液按照 1 ： 10 的比例混匀， 30 ℃培养 24 小时。
3 、取一环增菌液划线接种到李斯特氏菌显色培养基上， 37 ℃培养 24-48 小时。
质量控制
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀，具有良好的流动性，呈淡黄色。制备好的平板呈不透明乳白色培养基。
2 、微生物试验
在 37 ℃培养 24-48 小时：
| 质控菌株 | ATCC | 生长情况 | 菌落颜色 | 不透明环 |
| 单增李斯特氏菌 | 27853 | +++ | 蓝色 | + |
| 绵羊李斯特氏菌 | | +++ | 蓝色 | + |
| 西尔李斯特氏菌 | | +++ | 蓝色 | - |
| * | 25923 | ++ | 黄色 | - |
| 大肠杆菌 | 25922 | - | - | - |
| 沙门氏菌 | | - | - | - |
典型特征
单增李斯特氏菌 37 ℃培养 24-28 小时， 平板上出现蓝色菌落，菌落周围有一不透明环。绵羊李斯特氏菌 37 ℃培养 48 小时 ，平板上出现蓝色菌落，菌落周围有一不透明环。西尔李斯特氏菌 37 ℃培养 24-48 小时， 平板上出现蓝色菌落，菌落周围没有不透明环。在食品检测中绵羊李斯特氏菌非常少见。
