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PeproTech重组细胞因子常见问题解答

时间:2014-7-8阅读:1834
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PeproTech重组细胞因子常见问题解答

 

  PeproTech公司的重组细胞因子产品经过了十分严格的生产、纯化及质检过程,保证其在投放市场之前,达到如下要求:
1. 真实性:重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析;必要时应用SDS-PAGE, RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性。
2. 纯度:应用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析产品纯度。
3. 生物活性:进行相应的体外(in vitro)或体内(in vivo)活性检测。
4. 蛋白含量:通过紫外光谱分析,SDS-PAGE电泳检测;必要时应用HPLC定量标准蛋白溶液。
5. 内毒素:kinetic LAL法检测内毒素。
6. 微生物:重组蛋白在装瓶之前都经过滤除菌处理。

  产品随附的说明书上载有产品的各项相关信息。请仔细阅读这些信息,了解其配制和贮存提示。如果在阅读说明书后仍需更多信息,请查看以下常见问题解答,或致电我们的技术服务部门。

重组细胞因子的冻干状态
与市场上已有的其他蛋白产品不同,PeproTech细胞因子不含carrier protein或其他添加物(如BSA、HAS、蔗糖等),而是以低盐的形式做冻干处理,因此微量的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内,形成很薄或不可见的蛋白层。PeproTech的质控过程确保每管装有非常准确量的蛋白产品。所以我们建议在收到试剂后,务必于开盖前先离心20-30秒,使可能附于管盖或管壁的蛋白成分聚集于管低(此时能否见到白色沉淀均属正常现象)。

重组细胞因子活性单位(units)的换算
各公司在开发出重组细胞因子并检测其活性后,通常会以ED50(半数有效浓度)或units(活性单位)来标识其细胞因子的生物活性。因此1mg细胞因子中所含的活性单位(units)可以理解为将1mg/ml细胞因子原液稀释成ED50的稀释倍数,以下是二者的换算公式:

重组细胞因子的稳定性
除非产品说明书上另有特别说明,否则所有PeproTech蛋白产品都为冻干粉形式,在室温下也能保持很好的稳定性。但是,我们推荐冻干产品保存于-20℃。大多数冻干产品经溶解和稀释后,可短时间保存于4℃;若要进行较长时间保存,我们建议稀释到工作液浓度并加入一定的carrier protein(如0.1% BSA),然后分装保存于-20℃。请注意每一次冻融过程都会造成蛋白的部分变性,应避免反复冻融。

重组细胞因子的交叉活性
除了少数例外,大多数人类细胞因子对小鼠细胞都有活性。许多小鼠细胞因子对人类细胞也有活力表现,但是与相应的人类细胞因子相比比活力较低。一些人类的细胞因子如IL-7在小鼠细胞中甚至表现出比相应的小鼠细胞因子更高的比活力。而干扰素、GM-CSF、IL-3 和IL-4 是物种特异性的,对于非人类细胞几乎没有活性。相反,成纤维细胞生长因子 (FGFs) 和神经营养因子 (neurotrophins) 是高度保守的,在其它的动物物种细胞中也能表现很好的活性。

ECV304(人脐静脉内皮细胞株)  ATCC 株 
PC-12分化(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)  ATCC 株 
PA317(鼠胚胎成纤维细胞)  ATCC 株 
SP2/0(骨髓瘤细胞)  ATCC 株 
CHO(中国仓鼠卵巢细胞)  ATCC 株 
COS-7(SV40转化的非洲绿猴肾细胞)  ATCC 株 
VERO(非洲绿猴肾细胞)  ATCC 株 
Ana-1(鼠巨噬细胞)  ATCC 株 
J-1111(白血病单核细胞)  ATCC 株 
J774A1(单核细胞巨噬细胞)  ATCC 株 
SPA-A1(肺腺癌细胞)  ATCC 株 
A673(横纹肌瘤细胞)  ATCC 株 
L-02(正常肝细胞)  ATCC 株 
7721(7721肝癌细胞)  ATCC 株 
SK-N-SH(神经母细胞瘤)  ATCC 株 
HL-60(白血病原髓细胞)  ATCC 株 
ScaBER(膀胱鳞癌细胞)  ATCC 株 
WISH(羊膜细胞)  ATCC 株 
H08910(卵巢癌细胞)  ATCC 株 
Bcap-37(乳腺癌细胞)  ATCC 株 
Hela(宫颈癌细胞)  ATCC 株 
PC-3(人前列腺癌细胞)  ATCC 株 
SGC7901(胃腺癌细胞)  ATCC 株 
786-0(肾透明细胞腺癌)  ATCC 株 
6T-CEM(T细胞白血病)  ATCC 株 
Jecket(淋巴瘤细胞)  ATCC 株 
JAR(胚绒毛癌细胞)  ATCC 株 
PC-12未分化(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)  ATCC 株 
WI-38(人二倍体胚肺细胞)  ATCC 株 
THP-1(人单核细胞)  ATCC 株 
T-24(膀胱变移细胞癌)  ATCC 株 
A375(人类恶性黑色素瘤)  ATCC 株 
CHRF(人巨核细胞白血病)  ATCC 株 
K562(慢性髓原白血病)  ATCC 株 
RD(恶性胚胎横纹肌瘤)  ATCC 株 
CNE(鼻咽癌细胞)  ATCC 株 
RT4(膀胱癌细胞)  ATCC 株 
J82(膀胱癌细胞)  ATCC 株 
SHG44(胶质瘤细胞)  ATCC 株 
LoVo(人结肠癌细胞)  ATCC 株 
V79(中国仓鼠肺细胞)  ATCC 株 
U937(组织细胞淋巴瘤)  ATCC 株 
PT-67(病毒转染小鼠细胞)  ATCC 株 
HEL(红白血病细胞)  ATCC 株 
293(转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞)  ATCC 株 
C6(脑胶质瘤细胞)  ATCC 株 
SHZ-88(大鼠乳腺癌细胞)  ATCC 株 
CBRH-7919(大鼠肝癌细胞)  ATCC 株 
NCL-H460(非小细胞肺癌)  ATCC 株 
F9(畸胎瘤细胞)  ATCC 株 
5637(人膀胱癌细胞)  ATCC 株 
A549(人肺腺癌细胞)  ATCC 株 
MCF-7(人乳腺癌细胞)  ATCC 株 
B16(小鼠黑色素瘤细胞)  ATCC 株 
HCC1428(人乳腺癌细胞)  ATCC 株 
A-704(人肾癌细胞)  ATCC 株 
NCI-H1755 [H1755](人肺癌细胞)  ATCC 株 
SK-HEP-1(人肝癌细胞)  ATCC 株 
NCI-H838 [H838](人肺癌细胞)  ATCC 株 
SK-OV-3 [SKOV-3](人卵巢癌细胞)  ATCC 株 
HPAC(人胰腺癌细胞)  ATCC 株 
PC-3(人前列腺癌细胞)  ATCC 株 
SW 1088[SW-1088; SW1088](人脑星型胶质瘤细胞)  ATCC 株 
EB-3 [EB3](人淋巴样Burkitt淋巴瘤细胞)  ATCC 株 
HT-3(人子宫颈癌细胞)  ATCC 株 
TT(人骨髓样甲状腺癌细胞)  ATCC 株 
ES-2(人卵巢透明细胞癌细胞)  ATCC 株 
LoVo(人结肠癌细胞)  ATCC 株 
HT-29(人结肠癌细胞)  ATCC 株 
TE 115.T(人软组织纤维瘤细胞)  ATCC 株 
Cates-1B(人睾丸淋巴胚胎性癌细胞)  ATCC 株 
SNU-398(人肝癌细胞)  ATCC 株 
Hep 3B2.1-7 [Hep 3B; Hep-3B; Hep3B](人肝癌细胞)  ATCC 株 
SNU-182(人肝癌细胞)  ATCC 株 
PLC/PRF/5(人肝癌细胞)  ATCC 株 
WERI-Rb-1(人视网膜母细胞瘤)  ATCC 株 
PA-1(人卵巢畸胎瘤细胞)  ATCC 株 
Hs 578T(人乳腺成纤维细胞)  ATCC 株 
Hs 578Bst(人乳腺成纤维细胞)  ATCC 株 
TE 354.T(人皮肤基底细胞癌)  ATCC 株 
TE 353.Sk(人正常皮肤细胞)  ATCC 株 
SW480 [SW-480](人结肠癌细胞)  ATCC 株 
SW620 [SW-620](人结肠腺癌细胞)  ATCC 株 
NCI-H1299(人肺癌细胞)  ATCC 株 
PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)  ATCC 株 
COS-7(非洲青猴肾细胞)  ATCC 株 
TOV-112D(人上皮性卵巢癌细胞)  ATCC 株 
MRC-5(人正常胚肺成纤维细胞)  ATCC 株 
NCI-H1563 [H1563](人胚肺细胞)  ATCC 株 
NCI-H2170 [H2170](人肺鳞状细胞癌)  ATCC 株 
Hs888Lu(人肺成纤维细胞)  ATCC 株 
SW 1271 [SW-1271; SW1271](人肺腺癌细胞)  ATCC 株 
Hep G2(人肝癌细胞)  ATCC 株 
SJCRH30 [RC13; RMS 13; SJRH30](人骨髓横纹肌肉癌细胞)  ATCC 株 
C2C12(人肌肉成纤维细胞瘤)  ATCC 株 
G-7(小鼠骨骼肌肌肉母瘤细胞)  ATCC 株 
Sol8(小鼠骨骼肌肌肉母细胞)  ATCC 株 
BLO-11(小鼠骨骼成纤维细胞)  ATCC 株 
NOR-10(小鼠骨骼肌成纤维细胞)  ATCC 株 
NCI-H596 [H596](人肺癌细胞)  ATCC 株 
NCI-H520 [H520](人肺癌细胞)  ATCC 株 
NCI-H1703 [H1703](人肺癌细胞)  ATCC 株 
NCI-H226 [H226](人肺癌细胞)  ATCC 株 
SK-MES-1(人肺癌细胞)  ATCC 株 
NCI-H1869 [H1869](人肺癌细胞)  ATCC 株 
SW 900 [SW-900; SW900](人肺癌细胞)  ATCC 株 
7F2(小鼠杂交瘤细胞)  ATCC 株 
3T3-L1(小鼠脂肪细胞)  ATCC 株 
THLE-3(人肝上皮细胞)  ATCC 株 
PT67(小鼠逆转录病毒包装细胞)  ATCC 株 
hFOB 1.19(人SV40转染成骨细胞)  ATCC 株 
HIT-T15(仓鼠beta胰岛细胞)  ATCC 株 
Beta-TC-6(小鼠胰腺癌beta细胞)  ATCC 株 
Ca Ski(人小肠颈部表皮样癌细胞)  ATCC 株 
GC-2spd(ts)(小鼠精母细胞)  ATCC 株 
NCL-H548(人胰腺癌细胞)  ATCC 株 
Hs 683(人脑视神经胶质瘤细胞)  ATCC 株 
Hs 1.Tes(正常人睾丸细胞)  ATCC 株 
Hs 181.Tes(正常人睾丸细胞)  ATCC 株 
Y567 [VTT C-79094]  ATCC 株 
[X464-20C]  ATCC 株 
NCYC 234 [IPAZSC 148]  ATCC 株 
Y-99  ATCC 株 
STJ.EPI.H7  ATCC 株 
[CIP 104786]  ATCC 株 
[CIP 104328; IAM 13570; ICMP 5794; NCPPB 2991]  ATCC 株 
ICPB TR7 [C-1; ICMP 8639; NCPPB 2626]  ATCC 株 
R1000  ATCC 株 
A4  ATCC 株 
MSU-1  ATCC 株 
MSU-2  ATCC 株 
NRRL 2543 [LSHTM BB325]  ATCC 株 
R3  ATCC 株 
M-37  ATCC 株

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