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绿针假单胞菌培养的污染类型及处理
污染是细胞培养的大敌。预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一。一开始就要十分重视,应积极采取措施,防止污染,否则会前功尽弃,不仅浪费时间,而且浪费人力、物力,甚至造成无法弥补的损失。
细菌污染 | 可能原因 | 建议解决方法 |
细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染,即使在细胞培养液中加入了抗菌素(一般为预防剂量),也可能因为操作不慎而引起污染。zui常见的有革兰氏阳性菌,如枯草杆菌以及大肠杆菌、假单胞菌等革兰氏阴性菌,其中又以白色葡萄球菌较常见。 | 培养细胞受细菌污染后,会出现培养液变混浊,pH改变。也有的培养液肉眼观察无多少改变,只能在镜下发现菌体才知污染。所以,每天应仔细观察。污染后细胞发生病理改变,胞内颗粒增多、增粗,zui后变圆脱落死亡,造成试验失败和细胞株(系)丢失。
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真菌污染 | 可能原因 | 建议解决方法 |
真菌污染是细胞培养过程中zui常见的一种,尤其在霉雨季节进行细胞培养更易污染。zui常见的真菌有烟曲霉、黑曲菌、孔子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌。
| 培养细胞受细菌污染后,会出现培养液变混浊,pH改变。绿针假单胞菌也有的培养液肉眼观察无多少改变,只能在镜下发现菌体才知污染。所以,每天应仔细观察。污染后细胞发生病理改变,胞内颗粒增多、增粗,zui后变圆脱落死亡,造成试验失败和细胞株(系)丢失。 |
五、非同种细胞污染
由于细胞培养操作时各细胞株所需的器材和溶液没有严格分开,操作不当,往往会使一种细胞被另一种细胞污染。如“灵长类”细胞系发现猴和鼠类细胞的混合物,ERK/KD细胞是从兔肾中分离出来的,而现在句却认为是HeLa细胞。目前,世界上已有几十种细胞都被HeLa细胞所污染,致使许多实验宣告无效。
非细胞培养物所造成的化学成分的污染也偶有发生,大多是由于细胞培养所需物品清洗消毒不*而带入一些有毒化学物质所致。
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