片段筛选发现HIV逆转录酶抑制剂

近日，来自澳大利亚的科学家在学术期刊PNAS发表了一项研究进展，他们通过研究发现了三种针对HIV-1逆转录酶的片段化抑制剂，能够有效抑制HIV-1逆转录酶活性，为HIV-1预防和治疗药物开发提供了重要信息。

基于片段筛选的方法可用于发现新的活性位点或变构抑制剂以进行治疗干预。在该项研究中，研究人员利用饱和转移磁共振和体外活性实验的方法，发现了HIV-1逆转录酶的片段抑制剂，与非核苷酸类的RT抑制剂（NNRTI）和核苷酸RT抑制剂（NRTI）相比，这种片段抑制剂在化学结构和作用机制上存在很大不同。

研究人员鉴定出三种化合物能够抑制HIV-1逆转录酶的RNA和DNA依赖性DNA聚合酶活性，作用浓度在微摩级别但仍保留了抑制突变型逆转录酶的效能，其中包括抵抗NNRTI作用的三种突变：K103N,Y181C和G190A。这些化合物还能抑制莫洛尼鼠白血病病毒逆转录病毒的活性，但对E.coli DNA聚合酶I的Klenow片段没有抑制作用。

研究人员还进行了平衡态动力学分析，结果表明其中一个片段是HIV-1逆转录酶的竞争性抑制剂，专门作用于dNTP底物，而另一种化合物是逆转录酶聚合酶活性的竞争性抑制剂，专门作用于DNA模版/引物，因此这种化合物还能抑制RNase H活性。除此之外，这种dNTP竞争性逆转录酶抑制剂还保留了对抗NRTI抵抗型突变K65R和M184V的活性。在另一项抗病毒实验中，研究人员证明模版/引物竞争性复合物能够抑制HIV-1复制。hz1106    赖氨酸铁琼脂    250g    用于赖氨酸、硫化氢试验
    Lysine Iron Agar        
hz1107    EF-18琼脂    250g    用于滤膜法筛选食品中沙门氏菌，使用前加入无菌过滤的新生霉素，zui终浓度0.015g/L（SN/T 1059.1）
    EF-18 Agar        
hz1108    RVS肉汤    250g    用于沙门氏菌选择性增菌培养(ISO标准)
    Rappaport-Vassiliadis Soya Broth        
金黄色葡萄球菌检测培养基            
货号    产品名称    规格    产品说明与用途
hz1015    胰蛋白胨大豆肉汤    250g    用于金黄色葡萄球菌的MPN测定，增菌培养，NaCl浓度可根据需要而调整（GB，SN标准）
    Trypticase (Tryptic) Soy Broth        
hz1072    Baird-Parker?琼脂基础    250g    用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养（GB，SN，FDA标准）
    Baird-Parker Agar Base        
hz1073    改良Giolitti-Cantoni肉汤    250g    用于金黄色葡萄球菌的增菌培养（ISO标准）
    Giolitti-Cantoni Broth        
hz1074    7.5%氯化钠肉汤    250g    用于金黄色葡萄球菌的增菌培养（GB标准）
    7.5% Sodium Chloride Broth        
hz1007    营养肉汤培养基    250g    用于金黄色葡萄球菌的增菌培养（SN标准）
    Broth Medium        
hz1111    亚碲酸钠肉汤培养基基础    250g    用于金黄色葡萄球菌增菌培养，每100ml 培养基需另加入1%亚碲酸钠1ml
    Yolk lurite Broth Base        
hz1112    葡萄球菌增菌肉汤    250g    用于凝固酶阳性葡萄球菌的选择性增菌
    Staphylococcus Enrichment Broth        
hz1113    葡萄球菌选择性琼脂    250g    用于凝固酶阳性葡萄球菌的选择性分离培养
    Staphylococcus Selective Aga        
hz1114    卵黄甘露醇高盐琼脂基础    250g    用于食品中金黄色葡萄球菌的选择性分离培养
    Egg-Manitol Salt Agar        
hz1115    血液琼脂基础    250g    供分离营养要求较高的致病菌用，后加血液制成血平板
    Blood Agar Base        
hz1020    脑心浸出液肉汤    250g    用于营养要求较高的微生物的培养
    Brain Heaet Infusion Broth        
hz1021    哥伦比亚琼脂    250g    用于营养要求较高的微生物的培养及溶血试验
    Columbia Agar Base        
hz1118    甘露醇氯化钠琼脂    250g    用于金黄色葡萄球菌选择性分离培养
    Mannitol Salt Agar        
hz1119    甘露醇发酵培养基    250g    用于鉴别金黄色葡萄球菌发酵试验
    Mannitol Ferment Medium        
hz1120    甲苯胺蓝-DNA琼脂    250g    用于金黄色葡萄球菌核酸酶试验
    Toluidine Blue -DNA Agar        
酵母、霉菌检测培养基            
hz1121    察氏琼脂    250g    用于青霉，曲霉鉴定及保存菌种用（GB标准）
    Czapek Dox Agar        

综上所述，这项研究通过化合物筛选的方法发现三种片段具有对抗HIV-1逆转录酶活性的强大功能。这些片段化抑制剂的发现为HIV-1预防及治疗新药的开发提供了新的契机，具有非常重要的意义