ELISA试剂盒实验具体步骤解析

ELISA试剂盒实验具体步骤解析

1.ELISA试剂盒将抗原抗体反响固相化：即实验中的包被环节，使抗原或抗体吸附于固相载体外表。其机制可能是聚苯乙烯外表间的疏水基团能够无挑选性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不损坏蛋白分子结构，坚持其生物学特性和免疫学活性；
2.关闭：固相吸附蛋白对错特异性的，在包被意图免疫蛋白后，未吸附蛋白的固相外表依然有吸附其它蛋白的才能，为了保证抗原抗体反响的特异性，因而，包被剩下的固相外表应该用抗原抗体反响无关蛋白关闭。一般以为牛血清白蛋白是zui为抱负的关闭剂，也可用脱脂奶粉、明胶、牛血清替代。
3.抗原抗体反响：抗原或抗体在恰当的介质下可进行特异的抗原抗体反响。
4.酶反响：酶能够经过共价键与抗原或抗体连接构成物，当抗原抗体反响的时分，被检查靶方针中也了酶分子。
5.底物反响：在抗原抗体中的酶分子，能够促使底物发作色彩反响，检查人员能够裸眼调查，能够经过色彩来断定是不是有免疫反响的存在，经过色彩的深浅判断标本中相应抗原或抗体的含量，也可借用酶标仪在恰当的波长读取吸光度值。
ELISA试剂盒的基本原理即是将抗原抗体固定到特定的载体上进行反响，并经过酶催化底物发作化学变化将抗原抗体反响经过色彩的方式显现出来。