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技术解析:ELISA试剂盒的显色弱问题
显色一定要控制时间,根据试剂盒说明操作即可。一般来说,显色时间过短,结果偏低;显色时间过长,空白增高或者非特异性显色增加。
ELISA显色弱的可能原因
对应的解决方法
超过有效期的产品可能会产生很弱的信号
检查产品的有效期
加入试剂的体积和时间有误
确定所使用的每一个试剂的体积正确的和加入的时间是适当的
试剂、样品用前未能平衡
用前试剂、样品置室温平衡10分钟左右
缩短孵育时间能使实验的信号变弱
检查孵育的时间
在温度变化的环境内孵育酶标板
确定孵育的温度,应避免温度的变化
使用了被污染的试剂
检查试剂是否被污染
标准品/标本制备方法不规范
检查标准品/标本的制备,标准品应按说明书进行复溶和稀释。低温贮存的标本避免反复冻融,严禁使用溶血标本。样品用NaN3防腐,抑制了酶的反应
显色底物制备不规范
检查底物的制备,如体积是否正确,混合是否恰当充分
检测时间不当
是否在规定的时间内检测
仪器设定不正确,滤光片不匹配
仪器是否设定正确,滤光片的使用等
针对以上内容,如有不太清楚的地方,或是想要咨询了解更多相关ELISA的技术信息,您可以通过在线咨询、留言、等方式我司业务员。无论合作成功与否,我公司都将以zui真挚、zui热情的服务面对您。
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