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小鼠皮肤细胞,JB6-C41细胞
本公司在长期的细胞研究过程中不断优化实验条件,针对不同客户研究需要,提供包含神经元细胞、星形胶质细胞在内的多种原代细胞产品,并针对各类原代细胞的营养需求研发的培养产品。原代细胞产品产品经过细菌、真菌、霉菌、支原体和病毒检测,表达多种神经细胞特异性标记。原代细胞*培养基特别添加能有效改善细胞生长状态的营养物质和针对不同物种特别甄选的优质培养液,适合各类原代细胞的体外培养。
开始小鼠皮肤细胞,JB6-C41细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20 ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)
C02孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、—20℃冰箱
操作步骤:镜检,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸氢钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液*覆盖细胞表面。至细胞*脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
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