牛泛素（Ub）ELISA试剂盒 返回列表页

牛泛素(Ub)ELISA试剂盒本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记的抗原抗体结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中待测物质的浓度。 
注意事项：牛泛素(Ub)ELISA试剂盒标本的处理：

（1）细胞培养上清液 根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品，然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是稀释5倍。

（2）脑脊液 根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品，然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是5倍。

（3）血浆 ①用EDTA2K离心收集在真空血液收集管中的血液，5,000×g，15分钟，4℃，分离血浆样品，然后储存在零下80℃直到使用。②用试剂盒中的标准稀释液5倍稀释血浆以避免血浆中的干扰物质影响检测，按照说明书方法检测。

分析原理：牛泛素(Ub)ELISA试剂盒是基于标准的双抗夹心酶联免疫分析技术。将人肿瘤 坏死因子受体超家族成员B特异性抗体包被于96孔板中人肿瘤坏死因子受体超家族成员B的检测抗体为生 物素标记抗体试验样品和生物素标记的检测抗体相继加入到96孔中，然后洗涤平板。生物素-HRP加入96 孔中，未与生物素标检测抗体结合的，被洗涤缓冲液洗掉HRP的底物TMB可与HRP（辣根过氧化物酶）发生 酶促反应。TMB被HRP催化后变成蓝色物质，在加入酸性终止液后变为黄色。黄颜色的深浅与人肿瘤坏死因 子受体超家族成员B样品被捕获的量成正比。

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