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猪Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)检测试剂盒价格测定错误结果的原因分析

ELISA即酶联免疫吸附试验，是一种常用的固相酶免疫测定方法。Engvall 和Perlmann于1971年zui先应用该法进行了IgG定量测定，并命名为"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。猪Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)检测试剂盒价格的基本原理是：

①使抗原（或抗体）结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性；

②使抗原（或抗体）与某种酶联结成酶标抗原（或抗体），而且此酶标抗原（或抗体）既保留其免疫活性，又保留其酶活性；

③测定时将受检标本（抗体或抗原）和酶标抗原（或抗体）按不同步骤与固相载体表面的抗原或抗体进行反应，再用洗涤方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其它物质分开，zui后结合在固相载体上的酶量与标本中受检的抗体或抗原量成一定比例；再加入酶反应底物后，底物被酶催化后变为有色产物，根据其颜色反应的深浅进行定性或定量分析，以了解被测标本中抗体或抗原含量。

酶联免疫（ELISA）使用试剂盒检测过程中值得关注的问题

1、仪器质控

 为使仪器保持*工作状态，应建立维护和校正仪器的标准操作程序（SOP），所要控制的仪器包括移液器（加样枪）、温箱、洗板机和酶标仪。

◎移液器：猪Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)检测试剂盒价格加样量小（20-200μl），其准确性直接影响实验结果，利用称重法检查：低、中、高三个刻度分别吸取指示量的水，万分之一天平称重后计算吸量是否准确，一般应在±5%以内；

◎恒温箱： 经常检查恒温箱温度计所示的温度和水中（或温箱内）实测温度是否*，允许有±1℃的误差；

◎洗板机： 每个厂家设置洗板后的残留液有各自的规定，一般不超过2μl；人工扣板时，垫纸不湿；定期检查管孔是否堵塞；

◎酶标仪：经常维护其光学部分，防止滤光片霉变，定期检测校正，使其保持良好的工作性能。

2、试剂盒选择

◎应尽量选择正规厂家，产品经相应政府部门审核认可，试剂应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。

◎灵敏度：有二层含义，1）为试剂检出被检物质的zui低量的能力；2）为试剂对大量样品中阳性检出的能力。

◎特异性：常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部份的物质可能存在交叉反应，使测定结果升高，可能导致假阳性，所以交叉反应是评价其质量的关键指标。

◎精密度：猪Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)检测试剂盒价格一般指其批内CV%，其值应小于15%；定量试剂应同时考察线性范围。

◎准确度：通过添加回收实验进行评价。

◎简便性：指在不影响试剂的前三项指标的前题下，实验和测定步骤越少越好，在定性实验中结果判断简单明了，定量试验结果计算也应简单。

◎安全性：指试剂对操作者和环境安全无害无传染性。

◎经济性：试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本，而市场价格比较合理。

◎试剂评价：需要有的确证方法和确证的样品进行检测。

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