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一、实验目的
了解生物显微摄影的基本原理和装置,以及照相暗室工作的基本过程。
二、实验原理
显微摄影是通过摄影装置拍摄显微镜视野中物体影像的过程,它是*的一项常用显微技术。它的基本原理是将标本的图像,通过显微镜投射到感光材料(胶卷)上而成为*性记录。
三、实验仪器、材料和试剂
材料和标本:人类染色体标本,其它染色的生物标本片。
器材和仪器:显微镜、35毫米照像机、显微照明装置、自动曝光控制器、ASAl00黑白135胶卷、洗印和放大等成套的暗室设备。
试剂:D一72式普通显影液、SB-1式停影剂、F一5酸性定影液。
四、实验步骤
(一)拍摄前准备
1.光路合轴 使光轴与光束处于同一轴线上。
2.柯勒氏照明 使观察的视野获碍均匀而又充分的照明;防止杂散光对照相系统产生影响;使被摄物体不受热,影象清晰。
3.物镜与目镜合理组合 依标本的不同和显微摄影要求,物镜与目镜的组合有一定规范,如:拍摄人类染色体影像,采用高分辨率的100倍油镜,配合10倍目镜,可获得良好分辨的理想放大影像。
4.调整视场光阑和孔径光阑 使两者与所用物镜的数值孔径(N.A.镜口率)相等,所得的分辨力zui高;视场光阑一旦调好,不要再动,而孔径光阑可随物镜数值孔径的更换,做相应的调整。一般来说,把孔径光阑的大小调成等于相应该物镜孔径像的2/3为宜,尽管丧失了少许的分辨力,却能提高影像的反差、焦点深度和清晰度。
总之,上述作法是调整显微镜至*状态。
(二)拍摄程序
拍摄是显微摄影系列操作中的关键环节,在镜检观察中,发现需要摄下的影像应即时拍照。
1.开启相机后盖,安装胶卷于照相机内。
2.打开显微镜照明装置的电源开关,将亮度调至适当。
3.依个人的视力,调整摄影目镜调焦环至“井"字线清晰。
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