增强的基因组编辑技术帮助改造T细胞

科研人员报告了一种基因组编辑策略，它能增强改造人类T细胞的效率。尽管近来取得了使用CRISPR/Cas9工具的基因组编辑的进展，对人类T细胞基因组进行有效而专一的编辑仍然是一个挑战。使用由Cas9蛋白和实验室产生的单导向RNA分子组成的Cas9 核蛋白（Cas9 RNPs），Alexander Marson 及其同事有效而专一地编辑了CXCR4的DNA序列，CXCR4为人类助手T细胞表面的一个免疫受体编码，该受体让艾滋病病毒成为可能。他们使用一种瞄准被编辑的蛋白质的细胞分类技术分离出了这种修改后的细胞，并且使用深度测序证实了这类编辑。此外，这组作者把Cas9 核蛋白（Cas9 RNPs）与一个称为同源导向修复模板的定制设计的单链DNA分子结合起来，从而选择性地取代了从健康捐献者分离出来的人类T细胞CXCR4 的核苷酸。使用一种类似的方法，这组作者证明了PD1 的靶向核苷酸取代，PD1为人类T细胞的一个免疫检查点蛋白编码，它是癌症免疫疗法的一个成熟的靶标。由于短寿命的Cas9 核蛋白（Cas9 RNPs）通常在传送到细胞后的24小时后转变，在目标是改造人类原生T细胞从而应对免疫系统疾病的策略中，它们可能比让细胞暴露在Cas9种的方法更安全。

原文检索：Generation of knock-in primary human T cells using Cas9 ribonucleoproteins